阿托伐他汀钙对成骨前体细胞(3T3-E1)增殖与分化的影响及其与内质网应激的联系
2018-08-30王青罗欢徐丽丽王宾刘焕娜杨乃龙
中国骨质疏松杂志 2018年7期
王青 罗欢 徐丽丽 王宾 刘焕娜 杨乃龙
青岛大学医学院附属医院内分泌科,山东 青岛 266003
他汀类药物(statins)在临床上多用于高脂血症及心脑血管疾病的治疗,此前有研究表明,他汀类药物能促进骨形态发生蛋白2(BMP-2)的表达,修复骨微细结构,对骨代谢有一定影响[1]。内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)是指当机体处于缺血缺氧、氧化应激、功能蛋白基因突变、钙离子失衡、脂质合成紊乱等情况下,内质网失去正常的生理功能,通过一系列信号转导通路引起细胞内的保护性应答反应,是细胞的适应性调节过程[2]。近几年研究表明,内质网应激信号通路可能参与骨质疏松症的发生,从不同途径影响骨代谢平衡,但其具体机制仍未明确,与骨质疏松的关系需要进一步研究。本实验拟研究阿托伐他汀钙对3T3-E1细胞增殖及分化的影响,进一步探讨该过程与内质网应激通路相关基因表达的关系,为骨质疏松的临床治疗提供新的思路。
1 材料和方法
1.1 材料
3T3-E1细胞(由中科院上海细胞库提供);α-DMEM、胰蛋白酶、胎牛血清、双抗(美国Hyclone公司);TRIZOL(美国Gibco公司);Cell Counting Kit-8细胞增殖/毒性检测>试剂盒、碱性磷酸酶染色试剂盒(南京建成生物工程研究所有限公司);反转录试剂盒、RT-PCR试剂盒(北京天根生化科技公司);引物(上海生物工程技术服务有限公司);阿托伐他汀钙(辉瑞制药有限公司,商品名:立普妥)。
1.2 实验方法
1.2.13T3-E1细胞的培养:将-80 ℃冰箱冻存的细胞立即投入37~40 ℃水浴箱,水中晃动直至冻存液全部融化。细胞悬液移入离心管内,加培养液5……
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