探讨免疫组化检测脑胶质瘤IDH1及应用
2018-08-22王玉环
王玉环
源自神经上皮的肿瘤统称为脑胶质瘤,占颅脑肿瘤的40%~50%[1],是最常见的颅内恶性肿瘤,年发病率为3~8人/10万人口[2]。脑胶质瘤在临床上具有发病率高、复发率高、死亡率高、治愈率低的特点[3]。目前,脑胶质瘤的治疗手段以手术切除为主,术后辅助以放疗、化疗等手段,预后不佳[4]。IDH1是三羧酸循环中重要的关键限速酶[5],催化异柠檬酸氧化脱羧生成二氧化碳及α-酮戊二酸(α-KG),可为细胞新陈代谢提供能量和生物合成前体物质[6]。近年来,Parsons等[7]学者研究发现IDH1的异常表达与胶质瘤的发生密切相关,并且在胶质瘤的诊断、治疗、预后有重要意义。本文以胶质瘤作为研究样本,通过Ventana Bench Mark ULTRA 全自动免疫组化染色法及手工免疫组化SP染色法了解IDH1突变情况,探索IDH1突变与胶质瘤发展及其预后间的关系,为胶质瘤诊断与治疗提供理论依据,并为今后的深入研究奠定基础。
1 材料与方法
1.1 材料
收集2017年1月—2018年4月厦门大学附属第一医院手术切除的13例经病理学诊断为胶质瘤的肿瘤标本组织。13例患者术前均未接受药物化疗、放射治疗等其他治疗,并且排除合并其他全身性疾病。组织病理标本由我科经验丰富的主治医师取材,然后经固定、脱水、石蜡、包埋(制成蜡块)、切片、染色并详细筛选、复核后明确诊断为胶质瘤。
1.2 试剂
即用型鼠抗人IDH1R132H单克隆抗体(克隆号:H09), 购自福州迈新生科技术开发有限公司。ventana Bench Mark ULTRA全自动免疫组化仪上的试剂包括:DAB试剂盒(包含Ultra View Universal DAB inhibitor、Ultra View Universal HRP Multimer、Ultra View Universal DAB Chtomogen、Ultra View Universal DAB H2O2、Ultra ViewUniversal DAB Copper),脱蜡液(EzPrep),抗原修复液(CC1,pH8.5 Tris-EDTA),液体封盖膜(LCS),苏木精染液,靛蓝染色液,清洗缓冲液(Reaction Buffer),缓冲液(SSC),以上试剂均购自罗氏诊断产品(上海)有限公司。……
