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腺病毒介导BMP-4转染兔SMSCs软骨分化研究*

2018-08-21卫旭东温福利薛来恩张诗兰郑和平

实验动物科学 2018年3期
关键词:检测

卫旭东 党 源 温福利 薛来恩 张诗兰 郑和平

(1.蚌埠医学院福总教学医院(解放军福州总医院)骨科研究所,福州 350025) (2.南京军区福州总医院比较医学科,福州 350025)

关节软骨退变或损伤是临床上常见的问题,由于其是无神经、血管的终末分化组织,自身修复十分困难。临床上使用的自体、异体移植或者生物材料均不能从根本上解决软骨缺损的修复问题。新兴的组织工程软骨是目前最具潜力的修复方法,种子细胞、支架材料和诱导因子是修复再生的三大主导因素[1]。这其中最重要、最基本的就是选择一种种子细胞,具有向软骨分化的优势。近年来也发现了多种间充质干细胞具有向软骨分化的潜能,其中滑膜间充质干细胞(Synovial mesenchymal stem cells, SMSCs) 取材方便易分离,和关节软骨属于近亲同源组织,向软骨分化潜能最大[2],在体外培养较其他间充质干细胞能产生更多的软骨基质,并在多次传代后依旧保持高度成软骨特性[3-4]。其优良的生物学特性,成为再生软骨领域研究的热点[5-6]。

本实验中,使用腺病毒介导BMP-4基因感染兔SMSCs,并嵌入EGFP基因作为报告基因,对转染效率进行评价,摸索合适的转染条件。观察以腺病毒为载体携带的外源性BMP-4基因转入SMSCs所发生的生物学特性及向软骨细胞定向分化能力的变化,为SMSCs在以基因工程为基础的组织工程修复软骨方面的研究、应用提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 实验动物

1月龄雄性新西兰兔8只,普通级,体质量(1 000±200)g。由福建省连江玉华山自然生态农业试验场 [SCXK(闽)2014-0001]提供,合格证编号为35002000000082。……

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