丁洁

（贵州大学生命科学学院，贵州 贵阳 550025）

近年来，随着居民生存环境及生活习惯的不断变化，恶性肿瘤的发病率明显升高。目前，临床用于恶性肿瘤的治疗方案仍以根治术+放化疗为主，治疗期间，患者的痛苦往往较大，生活质量低。明确肿瘤的形成机制，是进一步提高疾病控制率的基础。

本文选取小鼠作为样本，以结肠癌为例，经对比实验，观察间充质干细胞在肿瘤微环境形成中的作用。

1 材料与方法

1.1 实验材料

选取小鼠60只作为样本，将其分为空白组、模型组、治疗组3组，3组小鼠均为20只。3组小鼠入选时，均为健康小鼠。空白组小鼠包括雌性8只，雄性12只，小鼠最高体重30.26 g，最低12.50 g，平均（25.20±1.64）g；模型组小鼠包括雌性9只，雄性11只，小鼠最高体重30.71 g，最低12.20 g，平均（25.33±1.75）g；治疗组小鼠包括雌性9只，雄性11只，小鼠最高体重30.08 g，最低12.14 g，平均（25.48±1.62）g。3组小鼠具有可比性（p＞0.05）。

1.2 实验方法

1.2.1 处理方法

空白组小鼠给予高压灭菌水饮用；模型组小鼠采用炎症诱发试剂（DSS）+诱发试剂（AOM）建立结肠癌模型；治疗组小鼠采用炎症诱发试剂（DSS）+诱发试剂（AOM）+间充质干细胞（MSCs）治疗。

1.2.2 肿瘤增殖

样本处理：样本处理70天后，将小鼠处死，取结肠，采用PBS冲洗，甲醛浸泡。

样本染色：制备肠组织石蜡切片，按照DAB免疫组化试剂盒脱蜡与水化，DBA显色，脱水、封片、镜检。

数据观察：观察PCNA增殖情况及Ki-67情况，选取5个视野进行样本计数。

1.3 观察指标

观察3组样本的肿瘤增殖情况。观察3组样本的Ki-67与PCNA表达情况。

1.4 统计学方法

采用SPSS 23.0软件处理数据，计数采用χ2检验，以“%”表示。计量采用t检验，以“均数±标准差”表示。“p＜0.05”视为数据差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组样本的肿瘤增殖情况

通过对3组样本肿瘤生长情况进行观察发现：①空白组小鼠结肠未见任何肿瘤结节；②模型组小鼠肠腔内可见大量肿瘤结节，表明结肠癌小鼠模型建立成功；③治疗组小鼠肠腔内虽可见肿瘤结节，但数量明显比模型组小鼠少。

2.2 3组样本的Ki-67与PCNA表达情况

通过对3组样本Ki-67与PCNA表达情况的观察发现，空白组小鼠的Ki-67与PCNA表达均未见异常；模型组小鼠与治疗组小鼠的PCNA表达对比情况见图1.模型组小鼠与治疗组小鼠的Ki-67表达对比情况见图2.

上述结果表明：与模型组小鼠相比，治疗组小鼠PCNA与Ki-67表达更低，两组实验数据差异有统计学意义（p＜0.05）。

图1 模型组小鼠与治疗组小鼠的PCNA表达

图2 模型组小鼠与治疗组小鼠的Ki-67表达

3 讨论

间充质干细胞来源于中胚层，为非造血前体细胞，在机体骨髓内含量极高。间充质干细胞可释放多种因子。在肿瘤微环境中，多种生长因子均能够促进间充质干细胞向肿瘤迁移[1-2]。可见，间充质干细胞在肿瘤基质的形成过程中广泛参与，且能够使肿瘤的微环境得到调节。肿瘤相关成纤维细胞属于肿瘤间质的主要细胞，临床研究发现，该细胞可能来源于纤维母细胞，当纤维母细胞分化时，该细胞随之形成。除此之外，机体的肿瘤细胞上皮-间质转分化，同样会产生肿瘤相关成纤维细胞[3]。

为明确间充质干细胞在肿瘤微环境形成中的作用，本文同样通过小鼠实验的方式，对两者之间的关系进行了观察。通过对3组样本肿瘤发生及生长情况的对比研究发现，未建立结肠癌模型的小鼠，其结肠未见任何肿瘤结节，这表明该组小鼠机体健康，结肠部分无肿瘤出现；建立了结肠癌模型的小鼠，其肠腔内可见大量肿瘤结节，表明结肠癌小鼠模型建立成功；在建立结肠癌模型的基础上，给予间充质干细胞注射的小鼠，其肠腔内虽可见肿瘤结节，但数量明显减少。通过上述结果分析得出，将间充质干细胞应用到结肠癌的治疗中，能有效减少肿瘤结节，对结肠癌起到一定的抑制作用，这说明间充质干细胞对肿瘤微环境的形成具有一定的影响作用。通过对3组样本Ki-67与PCNA表达情况的观察发现，未建立结肠癌模型的小鼠，其Ki-67与PCNA表达均未见异常。通过对模型组小鼠与治疗组小鼠Ki-67与PCNA表达情况的观察发现，治疗组小鼠PCNA与Ki-67表达更低，两组对比数据差异有统计学意义（p＜0.05）。上述研究结果表明：给予间充质干细胞治疗，能够有效减少Ki-67与PCNA表达。Ki-67与PCNA表达是肿瘤发生与进展的主要特征，两者表达量的降低，即表明肿瘤已经得到控制。因此可以推断，将间充质干细胞应用到结肠癌的治疗中，可在一定程度上抑制病情进展，延长患者的寿命。

受研究技术及样本量的影响，本课题的研究成果可能存在一定的不足，但间充质干细胞在肿瘤微环境形成中的作用已被证实。为使间充质干细胞的作用及价值能够得到体现，建议医疗卫生领域通过临床对比实验，进一步明确间充质干细胞的作用机制，为我国肿瘤患者疾病控制率的提升及寿命的延长奠定基础。

综上所述，间充质干细胞与肿瘤微环境之间可相互作用，从而影响肿瘤的增殖与分化。未来，临床可考虑在进一步明确间充质干细胞作用机制的基础上，将其应用到恶性肿瘤的治疗中，提高恶性肿瘤的控制率，延长患者的寿命。