CTLA4Ig联合青藤碱对异种移植肾存活时间的影响研究*
2018-08-20李建军陈选才谭书波龙建华罗志刚南华大学附属第二医院泌尿外科湖南衡阳421001
李建军,陈选才,谭书波,龙建华,罗志刚(南华大学附属第二医院泌尿外科,湖南衡阳421001)
器官移植排斥反应主要是由T细胞免疫反应的活化引起,该活化依赖于第一信号和第二信号的共同激活,缺一不可。第二信号途径是指抗原递呈细胞(APC)上的共刺激分子与T细胞受体结合而激活T细胞的免疫反应,而CD28和B7分子是最重要的一对共刺激分子[1],可阻断或干预该信号途径,将导致T细胞的凋亡及免疫抑制。研究发现,单克隆抗体细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4免疫球蛋白(CTLA4Ig)能通过竞争性抑制CD28与B7分子的结合,抑制T细胞免疫反应的激活,并通过诱导免疫耐受来延长移植物的存活时间[2]。中药青藤碱(SIN)是一种生物碱单体,来源于防已科植物青藤的根和茎。前期研究发现,SIN对T细胞、B淋巴细胞及树突状细胞等均有免疫抑制作用[3]。本研究通过术前局部转染CTLA4Ig基因、术后应用SIN,观察基因转染联合SIN对异种鼠移植肾存活时间的影响,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物肾移植供体为雄性豚鼠,重300~350 g,受体为雌性SD大鼠,重250~300 g,均购自中山大学中山医学院动物中心。
1.1.2 试药与试剂脂质体转染剂Lipofectamine2000、逆转录病毒包装质粒Gag-pol及辅助质粒pVSVG均购自杭州赫贝生物技术有限公司,GP-293包装细胞购自上海研域生物工程有限公司,PLNCX2-FLAG-CTLA4Ig重组质粒由华南肿瘤学实验室馈赠,SIN购自湖南正清股份有限公司。
1.2 方法
1.2.1 异种肾移植实验动物模型的建立及分组按照文献[4-5]中方法建立异种肾移植实验动物模型,共建立豚鼠/大鼠异种肾移植模型40只,并随机分为4组,每组各10只。……
