徐进，姚文

（1.四川省巴中市农林科学研究院，四川 巴中 636000；2.四川省巴中市川农动物医院，四川 巴中 636000）

巴贝斯虫病是以蜱作为传播媒介的血液原虫病。资料表明，在已知的70余种巴贝斯虫中，感染犬科动物的主要为犬巴贝斯虫、吉氏巴贝斯虫和魏氏巴贝斯虫。患犬临床上以贫血和发热为特征。

1 临床症状

患犬10月龄，体重32kg，体温39.5℃，其运动量减少，食欲低下，皮毛凌乱，尿液发黄，体表有蜱虫（见图1），眼结膜、齿龈等发白。

图1 体表蜱虫

2 诊断

2.1 血推片检查 患犬前肢静脉采血，推片，采用DIFF-QULK染色镜检。显微镜下见部分红细胞内有似吉氏巴贝斯虫的圆形体，如图2。

2.2 血常规检查 静脉采集患犬抗凝血2 mL，采用全自动血细胞分析仪进行血常规检查。

检查结果表明患犬中性粒细胞数、红细胞数、血红蛋白、红细胞压积、平均红细胞血红蛋白含量、平均红细胞血红蛋白浓度、血小板数等指标下降，提示患犬严重贫血。

图2 镜检结果

2.3 PCR检查 参考文献引物和荧光PCR鉴定方法，合成一对特异性检测巴贝斯虫18S rRNA基因的引物，采用SYBR Green I染料法，并与正常犬全血做对照，进行PCR鉴定。阳性PCR产物送生物工程公司测序，测序结果在GeneBank中进行Blast比对。采用DNAstar软件与文献报道的和GeneBank中收录的吉氏巴贝斯虫、犬巴贝斯虫、魏氏巴贝斯虫序列进行Clustal W方法比对后，进行DNA序列差异和同源性分析，PCR鉴定结果见图3，序列分析结果见图4。

PCR鉴定结果表明，患犬全血样品的PCR反应出现特异性的“S”型扩增曲线，溶解曲线结果表明该引物特异性良好，无非特异性扩增，与文献报道相符。……