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草鱼家系选育中的亲子鉴定研究

2018-08-09武栋

山西水利科技 2018年3期
关键词:检测

武 栋

(山西省鱼病防治中心 山西太原 030002)

微卫星标记,又被称为短串联重复序列或简单重复序列,是均匀分布于真核生物基因组中的简单重复序列,由2~6个核苷酸的串联重复片段构成,由于重复单位的重复次数在个体间呈高度变异性并且数量丰富,因此微卫星标记的应用非常广泛。微卫星位点通常通过PCR扩增,扩增产物通过电泳分析并根据大小分离等位基因进行检测。根据微卫星的重复类型可以把微卫星分为完全、不完全和复合型微卫星。微卫星在基因组中数目巨大,据估计,真核基因组中平均每6kb就存在一个微卫星序列[1]。毛细管电泳法是一项高效快速的分离分析技术,该方法以PCR扩增含有微卫星位点的目的DNA片段为基础,然后利用毛细管电泳法分离分析。毛细管电泳法主要是快速、微量、分辨率高、重复性好、易于定量和适合自动化检测等优点,它能保证系统的稳定性和PCR扩增的效果。因此,微卫星标记是强大的家庭跟踪工具[2]。

1 材料与方法

1.1 试验材料

本试验所用材料来自长江水系四大家鱼原种场人工繁殖的草鱼群体,包含该群体的所有亲本(父本14尾及母本16尾)及随机抽取的子代66尾,共96尾。

1.2 实验方法

1.2.1 样本收集及基因组DNA的提取

草鱼30尾亲本和随机子代样本66尾,剪取尾鳍,用95%乙醇浸泡,置4℃保存。本实验所用的软体动物基因组DNA提取试剂盒和提取草鱼鳍条DNA的方法均由天根生化科技有限公司提供。鳍条DNA提取后,用1%琼脂糖凝胶电泳检测基因组DNA提取物的完整性和纯度,并存储在-20℃冰箱备用。……

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