向俊蓓 万谦

摘 要：为研究耐热基因BnTR1对不同肿瘤细胞增殖的抑制作用，构建BnTR1条件表达载体，瞬时转染4种不同分化程度的肿瘤细胞。Western blot检测结果显示BnTR1的表达水平在几种肿瘤细胞中相近；MTT检测结果显示HGC和AGS的细胞增殖受到抑制，抑制作用HGC > AGS，而HT-29和MCF-7的细胞增殖不受到抑制。推断BnTR1对于分化程度低的肿瘤细胞增殖有抑制作用，而对于分化程度高的肿瘤细胞的增殖无明显抑制。

关键词：BnTR1 肿瘤启动子 肿瘤细胞的分化程度

中图分类号：S853.53 文献标识码：A 文章编号：1672-3791（2018）3（a）-0000-00

BnTR1基因（GU204975.1）来源于甘蓝型油菜 [1]，在植物中的功能包括抗热胁迫、抗盐胁迫等[1-2]。研究发现BnTR1对人宫颈癌细胞Hela和人肺癌细胞A549的增殖具有抑制作用，该抑制作用可以与抗癌化学药物顺铂cisplatin对Hela细胞和A549细胞的增殖抑制作用协同[3]。进一步研究发现，BnTR1编码一种泛素系统的E3连接酶，能对多种蛋白质包括某些转录因子进行泛素化[1，3-5]； BnTR1发挥抗胁迫功能和抑制肿瘤细胞增殖的功能，必须有其N端蛋白质结构中的RING结构域的存在[1，5]。由于人肿瘤细胞按不同标准可以分成许多不同类型，包括按分化程度的不同，可以大致划分为未分化、低分化和高分化，而其恶性程度的排序是：未分化>低分化>高分化。同时，不同分化程度的肿瘤细胞对于干预作用的反应是有差异的。因此，BnTR1能够抑制人肿瘤细胞增殖的特性值得深入研究。

基于此目的，研究中构建BnTR1条件表达载体，瞬时转染多种肿瘤细胞（人胃癌细胞HGC（未分化肿瘤细胞）、人胃癌细胞AGS（低分化肿瘤细胞）、人结肠癌细胞HT-29（高分化的肿瘤细胞）、人乳腺癌细胞MCF-7（高分化的肿瘤细胞））后，分别进行Western blot检测和MTT检测，分析TR1表达与肿瘤细胞的增殖表现的联系。