（茂名市动物疫病预防控制中心，广东茂名 525000）

H7N9亚型流感病毒（以下简称：H7N9）是A型流感中的一种。在2017年1月，H7N9出现变异，其对家禽的致病性由低转为高，人和家禽的健康都受到极大的威胁，因此，家禽的H7N9免疫势在必行。2017年6月农业部办公厅发文《关于切实做好广东广西H7N9免疫工作的通知》，从2017年7月1日起，H7N9灭活疫苗进入家禽免疫试点阶段。茂名市在广东试点范围内，为做好此次H7N9免疫试点工作，作者做了大量的疫苗推广工作，同时也开展了H7N9免疫抗体的监测，本文对监测数据进行了记录和分析，为本地区的免疫程序调整提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 样品来源

在广东省茂名市各区（县级市）随机对免疫过重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗（H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株）的家禽进行采样，其中包括：鸡场17家，采鸡血清483份；鸭场5家，采鸭血清60份；鹅场3家，采鹅血清49份。

1.2 主要工具

96孔“V”形微孔反应板、5-50ul单道移液器、5-50ul八道移液器。

1.3 主要试剂

禽流感病毒H7亚型血凝抑制试验抗原（哈兽研，批号2017010）、阴性血清、阳性血清、PBS液、1%鸡血红细胞。

1.4 检测方法

血凝（HA）及血凝抑制（HI）试验，参照《高致病性禽流感诊断技术》（GB/T18936-2003）。

2 实验结果

2.1 鸡H7N9免疫抗体检测结果

序号 监测点名称 用途 免疫次数 最后一次免疫剂量最后一次免疫日龄采样日龄抗体滴度log2值分布情况样品数（份）合格率/阳性率（%）0～1 2～3 4～5 6～7 ≧8合格数/阳性数（份）1 A区鸡场1 肉鸡 1 0.7ml 20 82 1 7 12 20 19 95.0 2 B区鸡场1 种鸡 1 0.5ml 14 39 5 1 49 6 61 55 90.2 3 B区鸡场2 肉鸡 1 0.5ml 36 73 8 5 29 28 70 57 81.4 4 C市鸡场1 蛋鸡 1 0.5ml 14 32 9 14 4 1 28 19 67.9 5 E市散养户1 肉鸡 1 0.5ml 35 101 1 4 5 5 100.0 6 E市散养户2 肉鸡 1 0.5ml 50 116 5 5 5 100.0 7 E市散养户3 肉鸡 1 0.5ml 81 147 1 2 2 5 5 100.0 8 E市鸡场1 肉鸡 1 0.7ml 35 107 6 12 2 20 20 100.0 9 E市鸡场2 肉鸡 1 1ml 35 91 1 2 16 19 19 100.0 10 A区鸡场2 肉鸡 2 0.7ml 45 77 1 19 20 20 100.0 11 C市鸡场2 肉鸡 2 1ml 42 78 79 79 79 100.0 12 D市鸡场1 蛋鸡 2 0.8ml 35 85 16 16 16 100.0 13 D市鸡场2 蛋鸡 2 0.8ml 35 85 60 60 60 100.0 14 D市鸡场3 蛋鸡 2 0.8ml 35 67 2 17 19 17 89.5 15 D市鸡场4 蛋鸡 2 0.8ml 35 63 20 20 20 100.0 16 D市鸡场5 蛋鸡 2 0.8ml 35 70 16 16 16 100.0 17 E市鸡场3 蛋鸡 2 0.7ml 35 50 4 8 8 20 20 100.0合计 25 6 56 113 283 483 452 93.6

2.2 鸭H7N9免疫抗体检测结果

序号 监测点名称 用途 免疫次数 免疫剂量 疫日龄 0～1 2～3 4～5 6～7 ≧8（份） （份） 性率（%）1 A区鸭场1 种鸭 1 0.5ml 14 30 12 3 5 10 30 18 60.0 2 A区鸭场2 肉鸭 1 1ml 14 48 1 8 1 10 9 90.0 3 A区鸭场3 肉鸭 1 0.7ml 13 50 2 3 5 3 60.0 4 A区鸭场4 肉鸭 1 0.7ml 14 48 2 3 5 3 60.0 5 C市鸭场1 肉鸭 1 0.5ml 15 45 6 1 3 10 4 40.0最后一次最后一次免 采样日龄 抗体滴度log2值分布情况 样品数 合格率/阳合格数/阳性数合计 22 1 4 16 17 60 37 61.7

2.3 鹅H7N9免疫抗体检测结果

序号 监测点名称 用途 免疫次数最后一次免疫剂量最后一次免疫日龄 采样日龄 抗体滴度log2值分布情况 样品数（份）合格率/阳性率（%）0～1 2～3 4～5 6～7 ≧8合格数/阳性数（份）1 A区鹅场1 肉鹅 1 0.5ml 20 62 30 30 0 0.0 2 E市鹅场1 肉鹅 1 0.5ml 14 28 15 15 0 0.0 3 E市鹅场2 种鹅 2 1.5ml 35 83 4 4 4 100.0合计 45 0 0 4 0 49 4 8.2

3 分析与总结

3.1 免疫效果判断

禽流感抗体血凝抑制试验（HI）抗体效价≥4log2判定为合格。存栏禽群免疫抗体合格率≥70% 判定为合格。

3.1.1 鸡免疫效果分析 在17个鸡场抽检483份鸡血清，抗体合格452份，合格率为93.6%。只进行一次免疫的鸡场9个，共采样233份，合格率87.6%，进行了二次免疫的鸡场8个，共采样250份，合格率99.2%。数据显示，所有鸡场在免疫后都产生了抗体，除一个鸡场合格率在70%以下外，其他16个鸡场抗体合格率都超过了80%，免疫两次明显比免疫一次好，抗体效价相对更稳定。合格率在70%以下的那个鸡场采样时间不正确，离免疫日期太近，没超过21天。

3.1.2 鸭免疫效果分析 在5个鸭场抽检60份鸭血清，抗体合格37份，合格率为61.7%。所抽检鸭场都只进行了一次免疫，数据显示，所有鸭场在免疫后都产生了抗体，但只有一个鸭场抗体合格率在70%以上，其他4个鸭场抗体合格率都在60%或以下，说明鸭只免疫一次抗体效价很难合格。

3.1.3 鹅免疫效果分析 在3个鹅场抽检49份鹅血清，抗体合格4份，合格率为8.2%。数据显示，只有免疫了二次的鹅场产生了抗体，合格率达到了70%以上，但效价平均水平不是很高，只免疫了1次的2个鹅场都没检出抗体，也可能是受检测中其他因素的影响，例如特异性可能受1%的鸡红细胞试剂影响。但总体来说，鹅只免疫一次抗体效价不好。

3.2 免疫情况总结

H7N9疫苗对鸡的免疫效果良好，对水禽的免疫效果存在较大差异。本文数据属大田试验数据受多种因素影响，例如采样地域不相同，养殖环境不相同，免疫日龄不相同，采样日龄不相同，所注射的疫苗厂家不相同（此文不做表述），但总体情况良好，茂名地区开展H7N9免疫后，2017年用苗3597.25万ml，没有发生过H7N9疫情。

3.3 推荐免疫程序

数据显示免疫剂量大效果偏好，免疫两次比免疫一次好，因此推荐免疫程序为，生长期超过70d的家禽实行两次免疫，首免14日龄二免35～42日龄。对人工饲养的鸡、鹌鹑、鸽子、珍禽等，疫苗免疫接种方法及剂量按相关产品说明书规定操作，即首免接种0.3ml，二免接种0.5ml。对只免疫一次的肉鸡，建议在20～35日龄接种0.7ml.对鸭鹅建议2～5周龄，每只接种 0.7ml；对5周龄以上的鸭，每只接种1ml；对5周龄以上的鹅，每只接种1.5ml。