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低温等离子体灭活核糖核酸酶研究

2018-07-25易志健喻学锋黄逸凡周文华朱剑豪

集成技术 2018年4期
关键词:结构

江 敏 王 菲 易志健 喻学锋 黄逸凡 周文华 朱剑豪

1(深圳市中科摩方科技有限公司 深圳 518114)2(中国科学院深圳先进技术研究院 生物医药与技术研究所 深圳 518055)

1 引 言

核糖核酸酶(Ribonuclease,RNase)广泛存在于各种环境中,在人和动物的唾液、汗液和血液中均可常见。它是由数个半胱胺酸基组成一类结构紧凑、体积较小的蛋白质。其中,半胱胺酸基之间采用二硫键连接形成[1],这种结构方式使得变性的核糖核酸酶容易在室温下恢复原有的结构,难以被灭活。同时,核糖核酸酶具有很强的生物学活性,容易使核糖核酸(Ribonucleic Acid,RNA)分解,对实验结果造成干扰,尤其是 RNA 提取实验。如何有效去除核糖核酸酶污染已成为实验室污染亟待解决的一个难题。目前,去除核糖核酸酶的常用方法有:焦碳酸二乙酯(DEPC)水溶液浸泡[1]、高温高压灭菌和RNase 抑制剂。然而,焦碳酸二乙酯是高活性烷化试剂,对人体有害且存在致癌风险;高温高压灭菌和 RNase 抑制剂不能使核糖核酸酶完全灭活。

低温等离子体因其含有大量高能电子、自由基和激发态原子等活性粒子,备受关注与研究。大量研究表明低温等离子体能够有效破坏蛋白质结构。Segat 等[2]利用低温等离子体对乳清分离蛋白溶液进行处理,发现作用 15 min 后,蛋白质全部发生了氧化。Kim[3]研究了氦气/氧气低温等离子体处理生物分子效应,发现活性氧自由基对细胞内多肽、DNA 和酶蛋白具有损伤作用。Deng 等[4]利用激光诱导技术从放电电压、氧气流量等方面研究氦气/氧气等离子体灭活蛋白的机制。……

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