扶肾方对尿毒症大鼠腹膜间充质TGF-β1、E-cadherin和α-SMA表达的影响*
2018-07-16雷洋洋杨洪涛
天津中医药 2018年7期
雷洋洋,杨 波,裴 明,林 燕,杨洪涛
(天津中医药大学第一附属医院,天津 300193)
腹膜纤维化作为长程腹膜透析常见并发症,可导致腹膜超滤与转运功能衰竭,腹膜结构、功能丧失。因此有必要探寻能够干预甚至逆转腹膜纤维化进程的分子机制,间充质间质转化(EMT)是腹膜纤维化起始和可逆环节,有效调控EMT可抑制甚至逆转早期腹膜纤维化,本课题拟采用天津中医药大学第一附属医院肾病科之扶肾方以中医学“和法”理论为宗,探讨扶肾方对尿毒症大鼠腹膜间充质EMT影响,为中医治疗腹透腹膜纤维化提供理论依据。
1 材料与方法
1.1实验动物SPF级雄性SD大鼠50只,体质量180~200 g,鼠龄6~8周,由中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供。
1.2主要实验试剂与仪器扶肾方中药饮片(天津中医药大学第一附属医院提供);肌酐生化试剂盒与尿素氮试剂盒(南京建成科技有限公司);转化生长因子-β1(TGF-β1)(北京中杉金桥生物科技有限公司);聚合酶链反应(PCR)试剂盒(北京天根生化科技有限公司);Bio-Rad CFX96型荧光定量PCR仪(美国伯乐公司);普通光学显微镜(日本Olympus公司产品);微量移液器(美国Eppendorf公司);低温高速离心机(美国Beckman公司);-20℃/4℃冰箱(青岛海尔)。
1.3分组与给药50只SD大鼠适应性喂养1周后,随机分为5组,每组10只,每日给予扶肾方中药灌胃,实验周期为6周,具体见表1。
1.4尿毒症模型鉴定50只雄性SD实验大鼠在处死之前,目内眦取血,3 000 r/min离心15 min后,取上清,检测血清肌酐值和血清尿素氮值。
1.5扶肾方含药血清的制备方法采用清洁级……
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