基于分子发夹/荧光微球的侧向层析法定量检测黄曲霉毒素B1
2018-07-06周子明谢彩玲
周子明,谢彩玲,赵 斌,2*,郭 狄
(1.中山火炬职业技术学院 生物医药系,广东 中山 528436;2.国家中药现代化工程技术中心中山分中心,广东 中山 528436;3.中山鼎晟质检服务有限公司,广东 中山 528400)
黄曲霉毒素B1(AFB1)是由黄曲霉和寄生曲霉等产生的一种次生代谢物,进入人体或动物体内后,会导致急、慢性中毒,甚至发生癌变或畸变[1-4]。近年来,各种食品、药品中AFB1超标现象频现,对人体健康构成严重威胁。因此,检测食物、药物等中AFB1的含量非常重要。
目前,检测AFB1的常用方法有薄层色谱法[5]、气相色谱法[6]、高效液相色谱法[7]、色谱-质谱联用法[8]、酶联免疫吸附法[9]。但上述方法存在检测仪器昂贵、操作不便、检测时间长等不足,亟需建立一种快速、简便的检测AFB1的新方法。
侧向层析法是继酶联免疫吸附法(ELISA)后发展起来的即时检测技术(Point of care test,POCT)[10-11]。自Beggs等[12]将免疫层析技术成功用于人绒毛膜促性腺激素(HCG)的测定后,胶体金免疫层析技术逐渐发展成为国际临床研究应用最广泛的快速诊断技术之一[13-15]。随着技术的发展,传统的胶体金定性检测技术已不能满足临床诊断需要,提高免疫层析技术的精确度和灵敏度势在必行,利用微米级的荧光微球(Fluorescent microsphere,FM)进行半定量或定量免疫层析技术已成为新的发展方向。荧光微球具有粒径均匀、表面光滑、单分散性好、荧光强度高、容易修饰等优点,已经被广泛应用于生物医学、食品安全等领域[16-18]。
适配体(Aptamer)是一类单链DNA或RNA序列,通过配体指数富集的系统进化技术(SELEX)筛选得到。由于Aptamer具有特异性高、热稳定性好、易于合成修饰以及靶物质广泛的特点,已被用于多种生物传感器的构建[19-23]。……
