赵一丁,闫婵娟,李文彬

(陕西省中医医院,西安 710003)

瘙痒的定义最早由德国医生Samuel Hafenreffer于350年前提出[1],是一种可引发搔抓意愿和搔抓反射的特异性皮肤感觉,可由多种皮肤疾病和系统性疾病引起,临床医生通常将持续时间超过 6周的瘙痒定义为慢性瘙痒[2],其发生率随年龄的增加而升高,严重影响患者的生活质量。由于瘙痒产生机制复杂,目前尚缺乏可以长期缓解的治疗手段,大量研究证实针刺对瘙痒具有不同程度的抑制作用[3],但作用机制尚不清楚,本研究拟构建瘙痒动物模型,通过针刺穴位,观察模型小鼠延髓β-内啡肽(β-EP)的表达,以期探讨针刺在对瘙痒调控过程中的作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物

健康C57B/6J雄性小鼠50只,SPF级,6～8周龄,体重 20～25 g,由西安交通大学医学部实验动物中心提供(许可证号SCXK2012-003)。饲养于12 h光照/12 h黑暗的环境中,室温控制在 18～24℃,湿度控制在50%～70%,光照时间 8:00—20:00,自由饮水进食。实验过程中对实验动物的处置均符合 2006年国家科技部发布的《关于善待实验动物的指导性意见》规定。

1.2 主要仪器及试剂

1.2.1 主要仪器

冰冻切片机(德国 LAIKA)、超低温冰箱(日本SANYO)、荧光显微镜(日本OLYMPUS)、台式离心机(美国 Benchmark)、电热恒温培养箱(上海生工生物工程股份有限公司)、蛋白垂直电泳槽(美国Biorad公司)、蛋白湿转仪(美国Biorad公司)、电泳仪(北京六一仪器厂)、摄像机(日本 SONY)、50 μL微注射器、0.25 mm×25 mm华佗牌一次性针灸针(苏州医疗用品厂有限公司)、微计量器、血管钳、手术刀、眼科剪等。

1.2.2 主要试剂

一 抗 Beta endorphin(66358-1-Ig,美 国Proteintech公司),Beta-actin(SC-47778,美国Santa Cruz Biotechnology公司),羊抗鼠二抗(31430,美国 PIERCE公司……