卢 迪，崔丽霞，石丹宁，陈 梦，杨 阳，牛建昭，赵丕文

（北京中医药大学生命科学学院 北京 100029）

四物汤，源于宋《太平惠民和剂局方》，由熟地、当归、白芍与川芎组成，具有补血、养血功效，用于治妇人诸疾，尤其冲任虚损所致各种妇科病证。作为中医经典方剂，近年来多项实验研究表明，四物汤及其组方有一定的雌激素样作用，本课题组在研究中也发现，四物汤可通过核受体ER途径发挥雌激素样作用[1]。GPER是新型雌激素受体，四物汤是否通过GPER途径发挥雌激素效应尚不明确，本实验旨在在既往研究的基础上深入探索四物汤是否经GPER介导途径发挥雌激素样效应及其可能分子机理。

1 材料

1.1 实验动物

健康雌性SD大鼠，出生后21天，体质量50 g，SPF级，斯贝福实验技术有限公司提供，生产许可证号:SCXK（京）2016-0002。动物饲养在温度适宜、自然光照动物室内。

1.2 实验药物

四物汤组方：熟地15 g，当归10 g，白芍10 g，川芎6 g，药物颗粒剂购自北京中医药大学附属东方医院，按体质量折算大鼠灌胃剂量（总生药材质量）为6.6 g·kg-1。阳性药物戊酸雌二醇（商品名：补佳乐）为拜耳医药有限公司生产，批号：195A5。

1.3 实验仪器和器材

低温离心机（3K15，SIGMA）、超净工作台（022-2522，北京亚泰隆实验技术中心）、倒置显微镜（TS100，NIKON），CO2培养箱（（MCO-20AIC，日本SANYO）、超净工作台（022-2522，北京亚泰实验技术中心）、多功能荧光酶标仪（SAFIRE2，TECAN），倒置荧光显微镜（IX71，OLYMPUS）、NuncTMLab-TekTM腔室载玻片系统（Thermo Scientific）。

1.4 实验试剂

α-MEM培养基（Hyclone），活性炭-葡聚糖处理的胎牛血清（CDT-FBS）（Cellgro，澳洲），0.25%胰蛋白酶（gibico），胶原酶Ⅰ（investergen），碱性磷酸酶染色试剂盒（钙钴法）（南京建成科技有限公司），激动剂G1、拮抗剂……