李辰旭，张 许

利拉鲁肽是一种人工合成的胰高血糖素样肽－1（glucagon－like peptide－1，GLP－1）类似物，用于治疗Ⅱ型糖尿病（type Ⅱ diabetes mellitus，T2DM）［1］。与天然的GLP－1相比，保留了其全部生物活性，分子量为3751.2，分子结构上不同的是用精氨酸取代了第34位上的赖氨酸，第26位赖氨酸上连接了一个由谷氨酸介导的16碳棕榈酰脂肪酸侧链，可延长其酰化产物与蛋白结合时间，使半衰期延长到12～14 h。利拉鲁肽于2010与美国上市，现广泛应用于多个国家，我国2011年底上市。本合成路线采用固相合成法，Fmoc（9－芴甲氧羰基）合成策略，载体利用Fmoc－Gly－Wang树脂逐步缩合，最后利用制备型高效液相纯化。

1 实验仪器与试剂

自制手动合成反应器，高效液相色谱仪（岛津LC－15A型，日本），电热恒温水浴锅（森信实验仪器有限公司DK－S24型，上海），台式离心机（安亭科学仪器厂TDL80－2B型，上海），循环水式多用真空泵（长城科工贸有限公司SHB－Ⅲ型，郑州），冷冻干燥仪（Rikakikai有限公司 FDU－1200 型，日本），全温振荡器（东联电子技术开发有限公司HZQ－Q型，哈尔滨），ZORBAX SB－C18型色谱柱 （安捷伦，美国），哌啶（国药集团化学试剂有限公司，上海），6－氯－1－羟基苯并三氮唑（Cl－HOBt，宝曼生物科技公司，上海），水合茚三酮（巴斯夫化工有限公司，天津），N′N－二异丙基二酰亚胺 （DIC）、 三氟乙酸（TFA）、三异丙基硅烷（TIS）购自吉尔生化，其他试剂均为市售色谱纯。需要Fmoc保护的氨基酸原料17种及Fmoc－Gly－Wang树脂（负载量为 0.27 mmol/g）均购自吉尔生化，含量均在99.3%以上：Fmoc－Arg （Pbf） －OH；Fmoc －Val－OH；Fmoc －Gly －OH；Fmoc－Leu－OH；Fmoc－Trp （Boc）－OH； Fmoc－Glu（OtBu）－OH；Fmoc－Lys（mtt）－OH；Fmoc－Gln（Trt）－OH；Fmoc－Tyr （tBu）－OH；Fmoc－Ser （tBu）－OH；Fmoc－Asp（OtBu）－OH； Fmoc－Thr（tBu）－OH；Boc－His（Trt）－OH；Fmoc－Ile－OH；Fmoc－Phe－OH；Fmoc－Glu－α－OtBu；Fmoc－Ala－OH。

2 实验方法

2.1 试剂准备 （1）二甲基酰胺（DMF）预处理：4LDMF中加入80 g五氧化二磷 （P2O5），静置48 h后油浴（105℃）减压蒸馏。（2）二氧甲烷（DCM）预处理：4 L DCM原溶液加入碳酸钾100 g，静置48 h。（3）DIC：8 ml DIC 加处理后的 DMF 92 ml。 （4）Cl－HOBt：8.5 g Cl－HOBt加 处理后 的 DMF 溶 解至100 ml。……