猪9型链球菌的分离鉴定及其生物学特性研究
2018-05-21张振江杜毅超任鹏飞陆晨阳霍孔林唐海波刘金凤吴健敏
张振江,杜毅超,任鹏飞,陆晨阳,霍孔林,唐海波,刘金凤,吴健敏*
(1.广西大学动物科学技术学院,广西南宁 530004;2.广西兽医研究所,广西南宁 530001)
链球菌(Streptococcus)可感染人、猪、牛、羊等,是一种重要的人畜共患病病原体,其主要传播方式为经口或呼吸道传播,也可垂直传播。猪链球菌(Streptococcussuis)是一种革兰阳性菌,对任何品种、年龄及性别的猪均易感[1],可引起脑膜炎、关节炎、多发性浆膜炎、败血症、肺炎和猝死等[2]。目前,链球菌有35种血清型,其中1、2、7、9型是猪的主要致病菌,以2型流行最广,致病性最强,其次为7型和9型。致病性猪链球菌主要的毒力因子有荚膜多糖(capsular polysaeeharide,CPS)、溶菌酶释放蛋白(muramidase-released protein,MRP)、胞外蛋白因子( extracellular protein factor,EF)、溶血素(suilysin,Sly)、谷氨酸脱氢酶(glutamic acid dehydrogenase,GDH)、纤连蛋白/血纤蛋白原结合蛋白( fibronectin-and fibrinogen-binding protein,FBPS)和毒力相关基因(orf2)等,我国目前流行的2型强毒株是同时具有上述7种毒力基因的高致病性菌株[2]。
2016年10月初,广西玉林某猪场保育猪突然采食下降或废绝,精神萎靡,随后10多头猪死亡,大部分为中等膘情猪。为确诊疫情,本实验室对送检死猪进行剖检,然后进行细菌分离鉴定、药敏试验及致病性、毒力因子、耐药性检测。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 样品来源 广西玉林市某猪场45日龄病死仔猪的病料。
1.1.2 主要试剂 普通营养肉汤,北京陆桥技术股份有限公司产品;细菌微量生化管、药敏纸片,杭州微生物试剂有限公司产品;电泳凝胶回收试剂盒,北京康为世纪公司产品;DNA Ladder Marker、PCR Mix,TaKaRa公司产品;血琼脂培养基(50 mL/L山羊血),广西兽医研究所按常规方法配制;其他常规试剂均为分析纯。
1.1.3 实验动物 昆明小鼠16只,体重20 g±2 g,购于广西医科大学实验动物中心。……
