棘胸蛙虹彩病毒疫苗制备及免疫技术

2018-05-21胡霭臻郑善坚林威丞金米雪谢梦佳包伊鹏

浙江农业科学 2018年5期

胡霭臻，郑善坚*，林威丞，金米雪，谢梦佳，包伊鹏，李柯

(浙江师范大学 a生化学院，b野生动物生物技术与保护利用浙江省重点实验室，浙江金华 321004)

棘胸蛙(Quasipaaspinosa)，又名石蛙，是我国棘蛙属中分布最广的物种之一。棘胸蛙主要分布于云南、贵州、安徽、江苏、浙江、江西、湖北、湖南、福建、广东、广西和香港等地[1]。20世纪80年代以后，我国棘胸蛙产业已初具规模，并且呈现快速发展的趋势[2]。

蛙病毒属病毒宿主广泛，可以感染爬行类、鱼类和两栖类，大部分病毒对宿主都有较强的致病性和致死性[3-4]。2016年本实验室从浙江丽水某养殖场的棘胸蛙上分离到虹彩病毒科、蛙病毒属病毒，暂命名为棘胸蛙虹彩病毒(QSIV)。感染该病毒的蛙腹部发红，头部、四肢皮肤溃烂，死亡率高达90%以上。免疫防治被认为是目前防治蛙等水生动物病毒性疾病的最有效、最安全和最有潜力的方法之一[5]，本文就棘胸蛙虹彩病毒的疫苗制备及免疫方法进行研究。

1 材料与方法

1.1 材料

棘胸蛙虹彩病毒(QSIV)为本实验室提供；实验用棘胸蛙来自绿谷清泉石蛙养殖合作社，平均规格(52±3.5)g；病毒DNA提取试剂盒购自TIANGEN公司；EPC细胞由浙江省淡水水产研究所惠赠；ELISA试剂盒、M119培养基(Gbico，11150059)、胎牛血清(BI，0010316)、β-丙内酯(索莱宝公司，20170711)、二乙烯亚胺(Sigma，8044)购自江苏凯基生物公司。