丛明日，牛军舰

（青岛中维安全检测有限公司，山东青岛 266000）

饲料中的总胆碱以游离态和结合态的形式存在，结合态胆碱主要来源于饲料本身，游离态胆碱主要来自添加的饲料级的氯化胆碱[1]。目前的国标方法NY/T1819[2]采用离子色谱法，但离子色谱仪比较贵，一般实验室通常配置的都是可见——紫外分光光度计，国标GB/T 17481[3]的分光度光度法只能检测预混料中的氯化胆碱，无法满足饲料中的总胆碱的检测。笔者结合婴幼儿食品和乳品中胆碱的测定的方法[4]，用1mol/L的HCl溶液水解过夜提取，甲醇低温沉淀杂质，过滤后浓缩，在低温下加入雷氏盐溶液，生成胆碱雷氏盐的结晶，再进行分光光度法测定。

1 测定的方法原理、仪器设备、试剂和测定步骤

1.1 方法原理

胆碱用1mol/L的HCl溶液提取后，在低温下加入雷氏盐生成胆碱雷氏盐的结晶，用丙酮溶解，定容，将其丙酮溶液在波长520nm下进行分光光度测定。

1.2 试剂

甲醇（分析纯，国药集团）；正丙醇（分析纯，国药集团）；5%雷氏盐（分析纯，国药集团）甲醇溶液：称取5g雷氏盐溶于甲醇，加甲醇稀释至100mL，混匀，置冰箱内保存；1mol/L HCl（分析纯，国药集团）溶液：90ml浓HCl加入到990ml的水中，混匀，放棕色瓶中保存；丙酮（分析纯，西陇化工）；氯化胆碱标准品（纯品，Sigma）。

1.3 仪器设备

RE-2000A旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；SHA-B水浴恒温振荡器（江苏天由有限公司）；UV mini-1240可见-紫外分光光度计（日本岛津）；TDL-5离心机（上海安亭科学仪器厂）；KQ-500DE数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；AB204-S电子分析天平（瑞士梅特勒托利多公司）。……