郭英

摘要：我国每年都有大量新收玉米入库，同时还有大量以往年份的储备玉米，这些都存在被真菌污染，产生真菌毒素，威胁人畜安全的危险，如何在储存过程中避免真菌大量繁殖，抑制黄曲霉毒素Bl的产生是本文研究的重点。现通过对三个品种玉米样品在不同水分条件下储存一段时间后黄曲霉毒素含量的变化进行检测和分析，寻找能够有效抑制黄曲霉毒素Bl产生的适宜储存水分。

关键词：玉米；真菌；黄曲霉毒素Bl

中图分类号：S513

文献标识码：B

文章编号：2095-9737（2018）04-0005-01

黄曲霉毒素Bl是一种病原真菌黄曲霉菌侵染玉米等农作物，繁殖生长过程中产生的众多真菌毒素当中的一种。黄曲霉毒素Bl的毒性很强，人畜误食黄曲霉毒素Bl会导致中毒反应，甚至会增大癌症发生危险，严重时能够直接导致死亡。

作为一个农业大国，我国玉米的产能居世界前列，玉米不单是重要的农产品和工业原料，还是食品及饲料的重要组成部分，玉米真菌毒素的研究是我国粮食安全的重要课题之一。

1 样品准备

选取黑龙江省种植范围比较广的三个品种先玉335、飞天358、绥玉23的玉米各5000 g，将三个品种的玉米分别平均分成10份，每份样品500 g。将这30份样品分别调节成相应的水分并进行编号如表1所示：

检测三个品种的玉米中的黄曲霉毒素Bl的含量，之后将做好编号并调节好水分的30份样品分别隔离储存3个月，检测其中黄曲霉毒素Bl的含量。

2 实验原理

一般来说检测玉米中黄曲霉毒素Bl有三种常用的方法。第一种为薄层色谱法，将玉米试样中黄曲霉毒素Bl进行一系列的提取、浓缩、薄层分离操作，最后在365 nm的紫外光下显色，通过显示蓝色荧光的最低检出量进行粗略定量。第二种为酶标法，将玉米试样中黄曲霉毒素Bl进行提取后进行脱脂、浓缩之后与定量特异性抗体进行反应，反应剩余的游离特异性抗体再与酶标板内的抗原结合，与加入的底物和酶标记物进行显色再与标准进行比较定量。第三种方法为胶体金快速定量法，將玉米试样中的黄曲霉毒素Bl提取到提取液中，在温度一定条件下与检测条中的胶体金微粒进行显色反应，使用读数仪对检测条上的质控线以及检测线的颜色深度进行测定，颜色的深度与黄曲霉毒素Bl的含量呈线性的相关关系，颜色与读数仪内置的曲线对应，自动计算出黄曲霉毒素Bl的总量。本实验采用的为第三种胶体金快速定量法。

3 黄曲霉毒素Bl含量检测

3.1 仪器及试剂

电子天平（分度值o.Ol g）；粉碎机（可使试样细度达到全部通过20目筛）；离心机（转速达到4000 r/min）；涡旋振荡仪；孵育器（可进行45℃恒温）；读数仪（自动计算并显示结果）；ROSA黄曲霉毒素Bl胶体金快速定量检测条；针头式过滤器；Whatman 2V滤纸；提取液（70%甲醇水溶液）。

3.2 实验方法

将500 g左右的样品粉碎至全部通过20目筛，混合均匀，写好编号备用。用电子天平（分度值0.01 g）准确称取玉米样品10.00 g于50 mL带盖离心管中，分别加入20.O mL提取液（70%甲醇水溶液），拧紧螺旋盖，使用涡旋振荡器震荡100 s，静置至澄清，吸取上层清液1.0 mL于3 mL离心管中，在离心机（调节转速为4000 r/min）中离心60 s。移取离心后的上清液100 μL于另一支3 mL离心管中，再加入1.0 mL稀释缓冲液，涡旋混匀待测。

将冷藏室中保存的胶体金检测条取出，放置一段时间直至其达到室温，同时启动孵育器开始预热，使其温度恒定在45℃±l℃。将恢复至室温的胶体金检测条平放于恒温完成的孵育器当中，撕开检测条的塑料薄膜露出加样口。准确移取300 μL待测液注入加样口中，盖好塑料薄膜封闭加样孔，关闭孵育器上盖，孵育5 min之后，将检测条取出插入读数仪中进行读数。如果黄曲霉毒素B1浓度太高超出检测浓度范围，则需移取300 μL待测液注入另一离心管中，再次加入1.O mL稀释缓冲液，涡旋混匀后重复上述步骤，进行再次测定。

4 数据处理

3个品种初始样品的黄曲霉毒素Bl检测结果均为未检出，在同样的条件下对3个品种的10份不同水分含量样品进行储存实验，3个月后对样品的黄曲霉毒素Bl含量分别进行检测。检测结果分别如表2，表3，表4所示。

5 结论

国家标准《GB 2761- 2011食品安全国家标准食品中真菌毒素限量》中规定，玉米中黄曲霉毒素Bl的含量不得超过20μg/kg，由实验数据可以看出，三个品种在储存实验中，不同水分含量的样品均表现出水分含量达到一定的高度后，随着水分含量的增加，黄曲霉毒素Bl的含量呈现上升趋势。初始样品中的黄曲霉毒素Bl均为未检出，三个品种的玉米经过3个月的储藏试验后，水分含量为13.5%以下的样品均未出现变化，而在水分含量达到14.3%以上时都超出了标准限量标准。试验样品在含水量处于13.7%—14. 1%时，黄曲霉毒素Bl含量有一定的增长。本实验的结果表明，玉米的含水量对黄曲霉毒素Bl在储存期间的增长有显著地影响，含水量在13.5%以下时其生长速度较慢。影响黄曲霉毒素Bl含量增长的条件还有很多，要进一步探寻玉米的安全储藏条件，还需要进一步的实验进行探索。