王悦

摘 要：麝香脑脉康胶囊为我公司独家生产品种，是根据中医临床治疗中风的经验而筛选的中药复方。根据当前社会发展形势的需求与新型生物药物的推广，传统的麝香脑脉康胶囊已经难以满足当前经济化与规格化的标准。本文将采取相应准确的方法测定药物中三种皂苷的含量，通过相关数据理性分析及成分含量的优化和确切数据，期望为药品市场的发展做一份贡献。关键词：高效液相法测定；麝香脑脉康胶囊；皂苷；含量方法研究高效液相法是依据高效液色谱仪进行制备溶液的波长与峰值分析，利用较小溶液的数据对比得出相应溶液内药品含量的数据提取，而后通过相应的差异得出相应的含量与药用价值结论，是确保实验过程中相对合理科学化的主要保障设备与测量设备。1 麝香脑脉康胶囊含量测定的必要性麝香脑脉康胶囊是我国中医药临床具备治疗中风、平肝熄风、化瘀通络、豁痰开窍作用的中药复方，其药性在主治脑梗塞恢复期有非常明显的益处，但相比较现代药物的综合药性相比，却在相关的药用和成本上偏高，其原因便出在麝香脑脉康胶囊含量——三种皂苷（三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1）的传统含量使用上。故而，采取先进的办法测定三种皂苷成份含量，通过有效的临床试验进一步将药效核实，在相对应区间内进行含量调控，一方面促进了我国相关药品的有效利用，另一方面也减轻了患者购买压力，对企业的综合发展有实际的意义。本方法为《中国药典》2015版收录的方法，其含量测定方法是将供试品经过处理后，用紫外检测器分析，在检测波长为203nm处有吸收峰，根据样品的色谱峰面积，利用外标法，可计算出总含量。本确认方案用以证明该方法在公司实验室条件下的适用性，以保证本公司采用该方法始终能得到稳定可靠的分析结果，从而降低对制品质量影响的风险。2 仪器与材料2.1 实验所需仪器沃特世高效液相色谱仪e2695、梅特勒电子天平、水浴锅2.2 实验材料三七皂苷R1对照品、人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rb1对照品、麝香脑脉康胶囊、色谱甲醇、色谱乙腈。3 方法与结果3.1 色谱条件与系统适应性实验针对药品含量测验进行相关溶液波长的测定，以十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂，将乙腈和蒸馏水分别作为流动相进行梯度洗脱，测验波长为203nm，从板数选择应按照三七皂苷R1的特性计算，峰值不低于4000。3.2 对照品溶液的制备对照品溶液制备的目的是为了通过相应色谱进行含量分析，从而缩小相应波长的差值，将药品溶液的含量确切进行记录。故而，应精密称定三七皂苷R1对照品、人参皂苷Rg1对照品和人参皂苷Rb1对照品，加甲醇溶液制成每1毫升含三七皂苷R10.1mg、人参皂苷Rg10.4mg、人参皂苷Rb10.4mg的混合溶液，即得。3.3 试品溶液的制备精密称定麝香脑脉康胶囊5g，精密加入甲醇50毫升，称定重量放置过夜，在80℃水浴环境中保持轻微沸腾2小时，放冷后再次称定重量，用甲醇补足减失的重量，再进行摇匀滤过，取续滤液。3.4 辅料干扰性试验依照药品处方进行除三种皂苷以外的辅料样品（水牛角浓缩粉，醋山甲粉，山羊角粉，大黄粉，硬脂酸镁）配制，按照试品溶液的配制方法，作为阴性溶液供后续使用。同时，依据审查对比性，将精密测量的对照品溶液、试品溶液、流动相和阴性对照溶液各10μl分别注入高效液相色谱仪内，记载相关规律和色谱图。实验结果表明：根据高效液色谱仪的分析，对照品溶液理论板数按三七皂苷R1峰计算大于4000。供试品溶液色谱图中各色谱峰的保留时间应与对照品溶液色谱图主峰的保留时间一致。阴性对照溶液与三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1对照品不存在峰值干扰的现象，故而也不会影响本药品的含量测定数据。3.5 线性关系与范围

取对照品溶液（分别取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rb1对照品各约40mg，三七皂苷R1对照品约10mg，精密称定，至50ml量瓶中加甲醇至刻度，溶解并混匀），分别精密量取3ml、4ml、5ml、6ml、7ml、8ml，分别加甲醇稀释至10ml量瓶中，分别精密吸取上述溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，以各主成份峰峰面积为纵坐标，以进样量为横坐标，进行回归。结果表明：2.2μg～6.4μg范围内，人参皂苷Rg1进样量与峰面积呈良好的线性关系y=3703942.3223×-16776.3818相关系数（R2）=0.9994>0.999；在2.2μg～6.4μg范围内，人参皂苷Rb1进样量与峰面积呈良好的线性关系y=2617373.0367×-15918.7434相关系数（R2）=0.9994>0.999；在0.6μg～1.6μg范围内，三七皂苷R1进样量与峰面积呈良好的线性关系y=2696900.6631×-2225.841相关系数（R2）=0.9994>0.999。3.6 重复性实验重复性实验的目的是为了确定样品含量方法中无意外，并确保数值准确的方法。故而，应采取试品溶液多份进行多次高效液相色谱仪的测量，对重复性获取的数据进行理性分析。结果表明：6份供试品各组分含量测定结果的相对标准偏差小于2.0%。3.7 精密度试验采取多样精密数據统一的试品溶液注入高效液相色谱仪进行逐步分析，并记录相关色谱图，确保相对应药品含量的波长与峰值不会出现较大的出入，以满足实验自身的合理性与精密性符合要求。结果表明：重复性试验和中间精密度试验含量测定结果的相对标准偏差小于2.0%。3.8 稳定性试验针对试品溶液自身稳定性是否存在干扰，应进行多组试品溶液的分格放置，以2h、4.5h、7h、12h与24h作为参评标准，而后逐个进行分析并通过相色谱仪进行含量的测定记载，具数据表明试品溶液稳定性较好，满足实验基本需求。3.9 样品的含量验证取三个批次麝香脑脉康胶囊样品测定含量，结果表明：三批样品的含量检测每粒含人参皂苷Rg1（G42H72O14）、人参皂苷Rb1（C54H92O23）和三七皂苷R1（C47H80O18）三者的总量均不少于4.0mg。4 结束语根据以上检测结果可以得知高效液相法测定方法可以有效的测定麝香脑脉康胶囊三种皂苷的含量，同时麝香脑脉康胶囊内的三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1满足当前药品的含量使用要求，为药品后续在未来的发展时，提供相对稳定的环境与市场需求埋下发展基础前提。参考文献[1]中华人民共和国药典；2015年.一部/国家药典委员会编-北京；中国医药科技出版社，2015.6[2]殷玥.HPLC-ELSD法同时测定消栓通胶囊中三七皂苷R_1、人参皂苷Rg_1的含量研究[J].亚太传统医药，2016，12（2）：23-26.[3]顾崇梅.高效液相色谱法同时测定伤科胶囊中3种皂苷的含量[J].西部中医药，2016，29（11）：27-29.[4]张凯，尹子郡，张跃进，等.HPLC法测定复方乌骨藤胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量[J].西北林学院学报，2016，31（1）：250-253.