尚冰清，周 丹，朱 宏，刘 昱，郭丽丽，汤仁仙，寇艳波

（徐州医科大学，1.免疫与代谢重点实验室；2.临床医学系院，江苏 徐州 221006）

基因的过表达和沉默是研究基因功能的重要手段。但是由于某些基因的编码产物在特定的细胞时期对细胞具有毒性或其减少严重影响细胞正常生长甚至导致细胞死亡，给这些基因生物学功能的阐明带来的极大地困难。此外，随着研究的深入，有报道表明某些基因表达水平的不同所引起的生物学表型也截然不同[1-2]。因此，可人工调控表达系统的建立对基因功能的研究将具有非常重要的意义。

近些年研究者们开发出了许多种类的可诱导表达系统，1995年由Gossen等[3]发现并改造的Tet-on系统尤为受关注。环境中没有四环素（tetracycline，Tc）或其衍生物如强力霉素（doxycycline，DOX） 存在时下游基因处于表达抑制状态，当Tc或DOX存在时下游基因启动表达[4]。传统的Tet-on系统具有可控性好、本底表达水平低、细胞毒性小等特点，但是它也存在一定的不足，如传统的Tet-on系统为双载体系统需要同时对TetR表达载体和目的基因表达载体同时进行遗传操作，并且目的基因过表达无法统一检测或实时监测。

热休克蛋白90（heat shock proteins 90，HSP 90）在细胞中含量丰富，约占细胞蛋白总量的1%-2%，其靶蛋白多在细胞生长调控及存活方面发挥着重要作用。研究发现HSP90α在肿瘤细胞中的表达量为正常细胞的2-10倍，例如：HBV相关性肝细胞癌，其含量的表达与肿瘤分级分期相联系[5-6]，提示其与细胞的恶性转化密切相关，并且HSP90α已作为肿瘤标记物应用于癌症的早期筛查。……