林 洁 ，吴广文 ，付长龙 ，洪秀娥 ，李 俐 ，林秋祥 ，吴明霞

（1.福建中医药大学中西医结合研究院，福建 福州 350122；2.福建中医药大学附属第二人民医院，福建 福州 350003；3.福建中医药大学康复医学院，福建 福州 350122）

骨关节炎（osteoarthritis，OA）是一种常见老年性多发疾病，发病部位常见于膝关节，表现为疼痛、肿胀、活动受限等，严重影响患者生活质量［1］。OA在中医学上属“痹证”范畴，以肝肾亏虚为病变根本，风寒湿邪是其致痹外因，病机总属本虚标实、本痿标痹［2-3］。电针作为传统针灸疗法与现代电疗结合产物，具有舒经活络、行气活血、消炎镇痛之效，对防治OA具有良好疗效［4-5］。前期研究表明：电针具有抑制软骨细胞凋亡、延缓OA关节软骨退变、促进关节软骨修复的作用［6-8］。本实验拟观察电针刺激大鼠内外膝眼一定时间后获得的血清（电针后血清）对TNFα诱导的大鼠体外软骨细胞凋亡模型的影响，并检测其 Erk1／2、C-Myc、C-Fos、C-Jun 基因表达情况，从而进一步阐明电针防治OA的作用机制。

1 材料

1.1 实验动物 2月龄SD雄性大鼠30只、4周龄SD雄性大鼠12只购自上海斯莱克实验动物有限责任公司，合格证号：SCXK（沪）2012-0002。实验动物饲养于福建中医药大学实验动物中心，使用许可证号：SYXK（闽）2014-0005，分笼饲养，自由饮水，标准饲料喂养。

1.2 实验试剂 磷酸盐缓冲液（PBS）、低糖型DMEM培养基、胎牛血清、二型胶原酶、0.25%胰蛋白酶（美国 Hyclone公司）；肿瘤坏死因子 α（TNFα，美国Sigma 公司）；Annexin V-FITC／PI凋亡试剂盒（江苏凯基生物技术股份有限公司）；逆转录试剂盒（日本TAKARA公司）；PCR引物 （上海铂尚生物技术有限公司）；诺唯赞qPCR SYBR Green Master Mix（南京诺唯赞生物科技有限公司）。……