松郁安神方对异相睡眠剥夺大鼠海马CREB表达的影响
2018-04-24曾雪爱周春权王秀峰张一帆黄俊山福建省中医药研究院福建福州350003福建省中医睡眠医学重点实验室福建福州350003
曾雪爱 ,周春权 ,王秀峰 ,张一帆 ,黄俊山 (1.福建省中医药研究院,福建 福州 350003;2.福建省中医睡眠医学重点实验室,福建 福州 350003)
睡眠是机体复原、整合和巩固记忆的重要环节,是维持生命所必须的过程,根据睡眠过程中脑电图、眼球运动情况,睡眠可分为快速眼球运动(rapid eye movement,REM)和非快速眼球运动(non rapideye movement,NREM)两个时相。其中 REM 睡眠亦称异相睡眠(paradoxical sleep),它对于保证学习、记忆和情感等大脑高级功能正常具有非常重要的作用[1]。随着生活节奏的加快和社会竞争的增加,睡眠障碍或睡眠相关疾病的发生率逐年增加,越来越多的人处于慢性睡眠剥夺状态。长期睡眠不足或异相睡眠剥夺(paradoxical sleep deprivation,PSD)严重影响人们的生活质量、身心健康和学习记忆。松郁安神方是黄俊山教授临床上治疗失眠的经验效方,临床上用于治疗失眠疗效显著。前期实验已证实该方能改善REM睡眠剥夺所致的大鼠学习记忆能力下降[2],本实验进一步通过检测大鼠海马学习记忆的关键蛋白——cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)的表达和变化,探讨松郁安神方改善PSD大鼠学习记忆能力的作用机制。
1 材料
1.1 动物 健康雄性Sprague-Dawley大鼠,清洁级,体质量(200±10)g,购自上海斯莱克实验动物有限责任公司,许可证号:SCXK(沪)2007-0005。动物置于实验环境中饲养3 d,给予充足食物和水。实验前将大鼠随机分为4组:对照组、PSD模型组、中药高剂量组、中药低剂量组,每组5只。
1.2 主要药品与试剂 RNAprep pure动物组织总RNA提取试剂盒、cDNA合成试剂盒(北京天根生化科技有限公司);SYBR Premix Ex Taq(大连TaKaRa公司);细胞裂解液、PMSF(碧云天生物技术有限公司);……
