酿酒葡萄品种SSR-PCR体系的优化与建立
2018-04-13马文瑞邹弯魏玉洁严密全莉王雪薇高林龙马静武运薛洁
马文瑞,邹弯,魏玉洁,严密,全莉,王雪薇,高林龙,马静,武运*,薛洁*
1(新疆农业大学 食品科学与药学学院,新疆 乌鲁木齐,830052)2(中国食品发酵工业研究院,北京,100015)
葡萄属于葡萄科(Vitaceae)葡萄属(Vitis L.),为木质藤本植物,是世界最古老的植物之一。优良葡萄品种是生产优质葡萄酒的关键因素之一,因此,酿酒葡萄种质资源的鉴定与分类是葡萄酒产业规范发展的基础。葡萄主要的繁殖方式为无性繁殖,不同产区间互相引种,出现同名异物,同物异名现象频率较高,又因葡萄种间杂交容易产生一些中间型和过渡型杂种,给葡萄的分类鉴定带来困难[1]。随着分子生物学技术在葡萄酒行业的发展,基于DNA指纹图谱技术的品种鉴定方法,应用于葡萄品种鉴别方面,得到了认可与青睐。DNA指纹图谱技术相对于传统的细胞学,孢粉学,细胞学和生物化学鉴定方法,该技术能够快速准确地对亲缘关系很近的品种或个体进行辨别[2]。
简单序列重复 (simple sequence repeats, SSR)技术是基于聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)的DNA指纹图谱技术,SSR技术也称简单重复序列,以少数几个碱基为单位的多次重复序列。该技术具有共显性遗传,可重复性高,多态性强等优点,已经广泛应用于品种鉴定、遗传多样性检测和遗传图谱的构建等方面,如THOMAS等人利用葡萄微卫星位点设计了5对引物,成功了区分了33个葡萄品种[3];郭印山等人筛选出多态性高的49对SSR引物对15份不同原产地的葡萄品种进行遗传多态性分析,结果表明,欧亚种和美洲种葡萄亲缘关系相对较近,而山葡萄与二者亲缘关系相对较远,引物VMC-NG4B9和VMC3G9能将15个葡萄品种区分开[4];……
