党亚丽 周亭屹

摘 要：目的是建立一种快速检测单增李斯特菌、副溶血弧菌和沙门氏菌的液相芯片检测方法。采用基于间接竞争法的原理，将3种细菌抗原分别与不同的聚苯乙烯微球偶联，以藻红蛋白（PE）荧光标记二抗为信号，优化反应条件，对建立的方法进行灵敏度、特异性和可重复性验证。结果显示，3种细菌检测抗体最佳加入量分别为10ng、10ng、5ng，建立的方法检测单增李斯特菌、副溶血弧菌和沙门氏菌的最低检测限均可达到103 CFU/mL，检测其他常见食源性致病菌无交叉反应。结论表明，建立了一种快速检测食品中金黄色葡萄球菌的液相芯片检测方法，能够应用于实际样品的检测。

关键词：单增李斯特菌 副溶血弧菌 沙门氏菌 液相芯片 检测

前言

近年来，食源性疾病已成为世界上最突出、最广泛的食品安全问题，病原微生物引起的食源性疾病则是影响食品安全的最主要因素之一[ 1 ]。微生物性食物中毒事件主要由食物污染或变质、生熟交叉污染等原因引起，且气温较高、气候潮湿的环境适于细菌生长繁殖，导致食物易于腐败变质，一旦储存、加工不当，极易发生由沙门氏菌、副溶血性弧菌等微生物引起的食物中毒。现行检测手段已无法满足日常对食源性致病菌检测的需要，目前检验检疫工作中常用于检测和鉴定食源性致病菌的方法主要有PCR、Southem Blot杂交、酶联免疫吸附法（ELISA）等一些简单的分子生物学和免疫学方法[ 2 ]。现行的检测方法一般以检测致病菌为主，需要增菌培养，检测时间长，无法满足高通量的检测要求，远不能满足食品检测的需要，市场迫切需要能同时检测食源性致病菌的灵敏度更高、特异性更强、简便快捷的高通量技术和方法[ 3 ]。……