血清与全反式维甲酸对神经干细胞分化及突起生长的作用差异❋

2018-04-08赵海霞任丽伊李云竹李淑蓉苏炳银

解剖学杂志 2018年6期

关键词：血清

赵海霞任丽伊左璇李云竹李淑蓉苏炳银△

(成都医学院， 1 发育与再生四川省重点实验室，>2 人体解剖与组织胚胎学教研室， 3 病理学与病理生理学教研室，成都 610500)

神经干细胞(neural stem cells, NSCs)是一群具有自我增殖和分化潜能的细胞，可修复和替代神经退行性疾病中受损的神经细胞，重建细胞环路和功能，随着神经干细胞研究的迅速发展，为神经退行性疾病的治疗提供了新的途径[1-2]。 NSCs[1]经各级神经前体细胞，可分化为成熟的神经细胞和神经胶质细胞[3]。因此，调控NSCs定向分化是目前应用于治疗的关键。目前，用于NSCs分化模型建立的主要诱导方式是血清和全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid, RA)诱导，本研究拟利用血清和RA分别诱导从胚胎小鼠分离并培养的NSCs，比较两者对NSCs的分化以及神经元突起生长的作用差异，为NSCs分化机制研究的模型选择提供基础实验依据。

1 材料和方法

1.1 实验动物

SPF级C57雌性和雄性小鼠(2～3个月年龄)购于成都达硕实验动物有限公司。

1.2 主要试剂

小鼠单克隆抗体nestin(ab6142)和小鼠单克隆抗体Map2(ab11267)、兔多克隆抗体GFAP(ab7260)购自Abcam公司；594标记的山羊抗小鼠IgG荧光二抗和488标记的羊抗兔IgG荧光二抗488购自Invitrogene公司；DMEM/F12(1∶1)基本培养基、胎牛血清、青霉素-链霉素双抗溶液、Accutase酶、B27、GlutaMax、Heparin购自Gibco公司；碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)和表皮生长因子(epithelial growth factor, EGF)购自PeproTech公司； RA、多聚赖氨酸(poly-D-lysine, PDL)购自Sigma公司；DAPI封片剂购自中杉金桥生物技术公司。