宋 军 马赛君 罗建华 刘 卉 徐 丽 李 丽 张智广 周瑞祥△

(1 福建医科大学基础医学院消化道恶性肿瘤教育部重点实验室， 福州 350122； 2 福州总医院第二住院部检验科， 福州 350002)

胃癌是导致原发性癌症死亡损失健康生命年(years of life lost，YLL)的第3大原因。2015年全球有130万胃癌病例和81.9万胃癌死亡病例[1]。在中国，胃癌的发病率男性仅次于肺癌排第2，女性胃癌发病率在乳腺癌、肺癌之后排第3，是死亡率最高的几种癌症之一，严重威胁人类健康[2]。褪黑素(melatonin，MLT)又名N乙酰5甲氧色胺，是一种吲哚类神经内分泌激素。研究表明，褪黑素具有抗肿瘤的作用，可以抑制胃癌、肝癌、乳腺癌[3]等多种肿瘤。褪黑素通过促进凋亡，抑制增殖，调节免疫等多种途径发挥抗癌作用，然而其抗癌作用的分子机制尚待明确。本研究选取人胃癌细胞系AGS和MGC803，探讨褪黑素作用后对细胞周期及增殖的影响，并检测与细胞周期及增殖相关蛋白的变化以阐明其抗胃癌作用及分子机制。

1 材料和方法

1.1 细胞和试剂

人胃癌细胞系AGS、MGC803购自上海细胞研究所。采用含10%胎牛血清的RPMI(Roswell Park Memorial Institute) 及MEM/F12培养液置于CO2培养箱中37℃培养。胎牛血清和培养液购自美国Hyclone公司。褪黑素购自美国Sigma-Aldrich公司，褪黑素溶于无水乙醇中，无水乙醇在培养基中的终浓度不超过1%。CellTiter 96®AQueousOne Solution Cell Proliferation Assay(MTS)细胞增殖试剂盒购自美国Promega公司；BD PharmingenTMPI/RNase Staining Buffer购自美国BD公司；RIPA细胞强裂解液和BCA蛋白定量试剂盒购自碧云天公司；蛋白酶抑制剂(cocktail)及蛋白磷酸酶抑制剂(PhosStop)购自瑞士Roche公司；聚偏二氟乙烯(PVDF)膜购自Millipore公司；化学发光检测底物CDP-STAR购自Roche公司；……