董立军 李 岚 宋国军

(1 包头医学院第二附属医院妇产科， 包头 014030； 2 南方医科大学第五附属医院放射科， 广州 510900)

卵巢癌是继宫颈癌和子宫内膜癌的三大恶性肿瘤之一，其病死率高居妇科恶性肿瘤之首，由于起病隐匿、且缺乏行之有效的实验室检测手段, 因此难于早期发现并诊断[1-5]。长链非编码 RNA(long non-coding RNA，lncRNA)因对靶基因表达的调控作用参与了许多癌症发生、发展的过程。前期研究表明，HOTAIR在卵巢癌组织中表达量明显高于正常卵巢组织, 提示可能在卵巢癌的发生、发展中扮演重要的角色。因此本研究拟在前期工作基础上进一步研究HOTAIR在卵巢癌中的作用及其机制, 为HOTAIR在卵巢癌中的作用以及精准治疗提供理论依据和基础。

1 材料和方法

1.1 主要材料与试剂

人卵巢癌细胞株SKOV3、A2780和OVCAR3由包头医学院第二附属医院妇产科实验室保存。主要试剂：RPMI-1640培养基购自GIBCO公司；胎牛血清、四季血清购自杭州四季青生物材料工程有限公司；青链霉素溶液(双抗)碧云天生物技术研究所胰酶RNA提取试剂盒；DMSO购自 Sigma公司；RNA提取试剂盒购自北京百泰克生物技术有限公司；逆转录试剂盒、PCR试剂盒、HOTAIR引物均购自广州复能基因有限公司。

1.2 研究对象

标本来源于行手术治疗的患者术中切除的新鲜组织，卵巢癌组织(病例组)来源于术前诊断为卵巢癌，术后病理确诊为卵巢癌患者20例，正常卵巢来源于因其他疾病(子宫肌瘤老年患者)行手术治疗，术后病理未提示卵巢癌病变的患者。

1.3 细胞培养

细胞先置于37℃水浴箱里融化复苏，复苏后加入10%血清1%双抗培养基孵育进行细胞传代，取对数生长的细胞。……