胡东昊 王乔新 刘凤云 谢金枝 李伟宏

(1 焦作职工医学院， 焦作 454150； 2 郑州澍青医学高等专科学校， 郑州 450064)

近年来，随着各种恶性肿瘤的发病率及死亡率的增高[1]，肿瘤的免疫治疗得到更广泛的关注，研究的热点也更倾向于开发新型肿瘤疫苗[2]。多肽疫苗作为一个很有潜力的肿瘤疫苗已经应用于各种肿瘤的免疫治疗中[3]。多肽疫苗在原有诱导细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic lymphocyte, CTL)能力的基础上也有新的进展，多表现在增强多肽疫苗抗肿瘤效应的策略方面。如提高CTL表位的免疫原性，与T辅助表位的联用，增加多肽的长度，克服HLA分子限制性等[4]。一些临床实验表明，与最小CTL表位单肽疫苗相比，用长肽进行疫苗接种能够改善特异性CTL应答[5]。CTNNA2属于癌睾抗原(cancer testis, CT)抗原，是与经典钙黏蛋白相关的细胞骨架组分连环蛋白家族的成员。其功能与细胞黏附有关，同时它与肿瘤的发生、发展、恶化程度相关[6]。CTNNA2在正常组织中仅仅表达于睾丸和脑组织，而在多发性骨髓瘤细胞、黑色素瘤细胞和卵巢癌细胞中都有显著的表达[7]。本研究选择CTNNA2进行预测并设计长肽进行免疫学活性实验，旨在为肿瘤多肽疫苗候选效果更好的长肽。

1 材料和方法

1.1 材料

MCF-7由实验室常规保存，采用37℃、体积分数5% CO2饱和湿度培养条件下，用含体积分数10%胎牛血清的RPMI 1640培养基常规培养。T2A2细胞:转染HLA-A*0201分子的TAP缺陷T2细胞系，用含体积分数10%胎牛血清的IMDM培养基在37℃、体积分数5% CO2细胞培养箱中培养。外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMCs)由HLA-A2+健康供者捐赠。HLA-A2+外周血健康供者来自寻找的健康供者。……