李美琪　曾伟灵　陶婉卿　孙玉红

(1.西南医科大学2014级临床药学专业； 2.西南医科大学2014级药学专业； 3.西南医科大学2016级影像学专业； 4.西南医科大学药学院药理教研室，四川 泸州　646000)

脑出血具有极高的致死率及致残率，在老年患者中尤为常见。脑水肿是脑出血后血肿周围组织继发性损伤，与血肿占位、继发性缺血、自由基连锁反应、炎症反应、凋亡等病理生理变化可能有关[1]。水通道蛋白尤其是水通道蛋白4(Aquaporin4，AQP4)参与了脑水肿的形成和消退过程，起着调节细胞凋亡期间水穿过细胞膜的作用[2-3]。Rosenberg等研究发现AQP4在颅内出血后脑水肿的表达为一动态变化过程，脑出血后6 h血肿周围组织AQP4蛋白明显增加，出血后3 d达到高峰，以后逐渐下降[4]。脑出血组织损伤导致脑水肿与坏死和凋亡有关，Caspase-3以及Bcl-2作为主要的凋亡蛋白参与了脑出血的继发性损伤[5]。在脑出血患者血肿周围组织中Bcl-2蛋白表达降低，Caspase-3蛋白表达增加。但目前对AQP-4在脑水肿继发性损伤中的作用与凋亡蛋白表达间有无关系目前尚不清楚，据此本研究提出能否通过干扰AQP4表达，影响脑组织周围参与凋亡的蛋白表达，从而产生保护脑血肿周围组织，减轻脑水肿与继发性损害作用，为脑出血患者治疗提供新的思路。

1　材料与方法

1.1　材料

靶向AQP4的siRNA表达质粒，引物(上海生工生物工程有限公司)，RT-PCR试剂盒(大连宝生物有限公司)；雄性SD大鼠(购自西南医科大学动物实验中心，生产许可证号：SCXK(川)2013-17)；β-actin，Caspase-3，Bcl-2兔抗大鼠单克隆抗体(abcam公司)；凝血酶Ⅶ(sigma公司)。

1.2　方法

1.2.1 大鼠分组及脑出血模型制备