肖 莉 钟坪杉 吴鹏俐 阳德飞 陈晓琴 杨 拯 李 健△

(成都医学院， 1 人体解剖学教研室， 2 2013级临床医学专业， 3 2014级麻醉学专业， 4 2014级临床医学专业， 5 2015级医学影像学专业， 6实验技术教研室， 成都 610500)

肝缺血再灌注损伤(hepatic ischemia reperfusion injury，HIRI)是肝及创伤外科手术常见的病理生理过程[1]。HIRI是一个级联炎症反应过程，涉及肝微血管紊乱、Kupffer细胞激活、炎性细胞因子等多种因素的参与[2-3]。基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase 9，MMP-9)属于基质金属蛋白酶家族成员之一，活化的MMP-9通过降解血管内皮细胞及肝窦细胞外基质(extracellular matrix，ECM)，促进中性粒细胞跨越内皮细胞间隙及肝窦ECM向缺血再灌注组织迁移、浸润[4-5]。半胱天冬酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1，caspase-1)是与机体炎症反应密切相关的一种蛋白酶，可促进白细胞介素(interleukin，IL)-1β、IL-18和IL-33等细胞因子成熟，而IL-1β、IL-18 在肝缺血再灌注损伤中起重要作用。促红细胞生成素(erythropoietin，EPO)是肾在低氧环境下产生的一种能够刺激红细胞生成和分化的细胞因子。有研究表明EPO对HIRI具有保护作用[6-7]，但是否通过抑制MMP-9、caspase-1介导的过度炎症反应仍未明确。本研究通过建立肝缺血再灌注模型，观察EPO对HIRI相关因子MMP-9、caspase-1表达及病理形态学的影响，探讨EPO对HIRI的保护作用及机制。

1 材料和方法

1.1 动物分组

选用四川省人民医院实验动物研究所提供的健康SPF级的SD大鼠50只，雄性，体质量(200±20)g。采用随机数字表法，将实验大鼠分为5组，每组10只，缺血再灌注损伤组(I/R组)，促红细胞生成素低剂量组(L组)、中剂量组(M组)、高剂量组(H组)、假手术组。

1.2 药品及试剂

EPO(商品名：重组人促红素注射液，沈阳三生制药有限责任公司)；MMP-9抗体、caspase-1抗体、SABC免疫组织化学试剂盒购于武汉博士得生物工程有限公司；……