魏 仑 陈亚敏 张晓芳 郝建红 辛 晓 吴靖芳 高福禄

(河北北方学院基础医学院, 1 2014级临床医学专业本科生, 2 2014级临床医学专业形态学实验教学中心， 张家口 075000;3 河北师范大学， 石家庄 050024)

哺乳动物原始造血系统始于胚外中胚层的卵黄囊。但近年的研究表明，永久造血首先起源于胚内主动脉-性腺-中肾(aorta-gonad-mesonephros，AGM)区，从AGM区到胎肝迁移路径可能是生成造血细胞的主要部位[1]。之后胎肝、脾、胸腺、淋巴结和骨髓开始造血，且生后造血器官的迁变仍在继续进行。在小鼠胚胎发育期间，造血系统的发生表现为多时间点的连续过程[2]。小鼠脾造血始于胚胎(embryonic period，E)15.5 d，由造血干细胞从卵黄囊血岛或肝经血液循环迁入脾的间充质内，并逐渐增殖分化形成红细胞系、粒细胞系和巨核细胞血小板系，构成髓样造血结构[3]。本研究对小鼠脾生后发育进行了连续的形态学观察，旨在探索脾生后发育规律。

1 材料和方法

1.1 实验动物与试剂

随机选取体重25～35 g的性成熟健康KM小鼠36只，12只雄性，24只雌性(河北北方学院实验动物中心)。生理盐水、Bouin固定液、蒸馏水、石蜡、梯度乙醇、二甲苯、苏木精、伊红、Giemsa染液、过碘酸、Schiff试剂、枸橼酸缓冲液、兔CD36一抗、免疫组织化学ABC试剂盒。

1.2 取材

健康小鼠，雌雄比例按2∶1于晚18∶00合笼饲养，次日早7∶00检查雌性小鼠阴栓，见阴栓之日起为妊娠(gestationday，GD)0 d。所有小鼠均饲养于自然光照充足的环境，自由进食。于 GD19 d 密切观察孕鼠生产情况，生后仔鼠记为生后(puerperal，P)1 d。选择P1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31 d小鼠为研究对象，采用颈椎脱臼处死法，开腹迅速取出小鼠脾，Bouin固定液固定24 h，常规石蜡包埋。……