环介导等温扩增技术作为基因快速诊断方法的研究与展望
2018-03-31袁向芬吕继洲吴绍强王巧黎赵宏
生物技术通报 2018年10期
袁向芬 吕继洲 吴绍强 王巧黎 赵宏
(1. 中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所,北京 100176;2. 青岛市中心医院,青岛 266042)
2000年,日本学者Notomi发明了一种新型等温核酸扩增方法——环介导等温扩增技术(Loopmediated isothermal amplification,LAMP)[1], 经 近20年研究积累,该方法灵敏度高、特异性强、易于操作等优点已被广泛接受,LAMP亦被认为是一种可有效规避PCR检测对仪器设备的依赖、行之有效的现场快速筛查技术,并开始应用于病原微生物及物种鉴定、疫病现场检测、临床诊疗等领域。本文结合LAMP技术优势,对其发展及应用现状进行了综述,并对其目前存在的不足、技术群的发展需求和趋势进行了分析,希望有助于LAMP技术的进一步推广应用。菜豆花叶坏死病毒[12]等植物病原。此外,LAMP技术还被应用于转基因大豆[13]等的品系研究,以及中药人参成分鉴定[14]、奶牛胚胎早期性别鉴定[15]等领域。
1 LAMP技术检测及应用现状
LAMP方法与常规的核酸扩增法相比具备其独特优点:恒温扩增、高效快速、灵敏度高、特异性强、结果判定简单,使得LAMP技术成为继PCR技术后受研究人员青睐的核酸检测方法之一。
LAMP在细菌检测方面的研究和应用较广泛,目前本技术已应用于结核杆菌、肺炎链球菌、副溶血性弧菌等多种常见致病菌的检测,主要原因在于:一方面,细菌的核酸抽提简单易行,可采用直接煮沸法等方式进行;同时,细菌基因组较为保守,借助LAMP的高效扩增优势,有助于疫病的快速确诊。如Ahmad等[2]建立了一种检测水中大肠杆菌及检测水中肠球菌的LAMP检测方法;……
登录APP查看全文
