牛瘤胃宏基因组文库来源的新型木聚糖酶基因的克隆、表达及酶学性质
2018-03-21陈庆隆钟国祥马吉平
微生物学杂志 2018年1期
姚 健, 陈庆隆, 钟国祥, 马吉平, 桂 伦
(江西省农业科学院 农业应用微生物研究所,江西 南昌 330200)
木聚糖是植物细胞壁中半纤维素的重要组成部分,约占细胞干重的35%,是自然界中继纤维素之后的第二丰富的可再生生物质资源[1]。木聚糖是一种复杂的多糖类物质,其主干由 β-1, 4-糖苷键将 β-D-吡喃木糖连接成多聚物,在多聚物主链β -D-吡喃木糖残基的 O-2 或 O-3 位置上连有 4-O-甲基-D-葡萄糖醛酸,严重影响了木聚糖在水中的可溶性,这意味着大部分的木聚糖在自然界中很难被充分利用[2]。木聚糖酶是一种可将木聚糖降解成低聚木糖和木糖的多组符合酶系,其中内切木聚糖酶作用于木聚糖主链,能够产生不同长度的木寡糖和少量的木糖,是木聚糖降解酶系中最关键的酶,同时也是应用较广泛的酶[3],在纸浆助漂、面包烘烤、能源、饲料及环境等领域都有应用。木聚糖酶在自然界中分布十分广泛,在细菌、真菌、海洋藻类、陆地植物组织以及反刍动物瘤胃、蜗牛及甲壳动物中都有存在[4]。反刍动物的瘤胃中栖息着复杂多样的微生物,蕴藏着巨大的基因和生态资源,是酶制剂资源开发的巨大宝库。但是,目前瘤胃中89%的微生物仍未被分离纯培养,使瘤胃中多种微生物基因资源难以被挖掘利用[5]。本研究利用宏基因组技术,直接提取牛瘤胃内容物中全部微生物的总DNA,构建牛瘤胃宏基因组文库,利用功能驱动筛选方法从中筛选到1个木聚糖酶基因,并对其进行了异源重组表达和酶学性质研究。……
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