Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒VP1基因在昆虫细胞中的表达及鉴定
2018-03-14顾玲玲朱善元王安平
顾玲玲，吴 萌，朱善元，王安平
(江苏农牧科技职业学院/江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室，江苏泰州225300)
鸭病毒性肝炎(Duck viral hepatitis，DVH)是由鸭甲型肝炎病毒(Duck hepatitis A virus，DHAV)引起的、主要侵害3周龄以下雏鸭的一种高度接触性致死性传染病，1周龄以内的雏鸭病死率可高达100%，对养鸭业造成了严重危害。DHAV可分为3种血清型:DHAV－Ⅰ(经典的血清型)、DHAV－Ⅱ(新发现于台湾的血清型)和DHAV－Ⅲ(新发现于中国和韩国的血清型)，3个血清型之间存在明显的差异，无交叉免疫性［1-2］。
目前，我国DHAV－Ⅰ流行较普遍。DHAV－Ⅰ病毒粒子呈球形或类球形，无囊膜。基因组大小约7 690 bp，只编码1个开放阅读框(ORF)，病毒基因组编码的多聚蛋白在病毒自身编码的蛋白酶的作用下水解成1个结构蛋白区(P1)和2个非结构蛋白区(P2和P3)。P1区进一步水解为VP0、VP1和VP3等3种结构蛋白，P2区进一步水解为2A1、2A2(2A3)、2B和2C等4种或5种非结构蛋白，P3区进一步水解为3A、3B、3C和3D等4种非结构蛋白。其中，VP1蛋白为其主要的结构蛋白，位于病毒衣壳表面，是决定病毒抗原性的主要成分［3-4］，而且VP1包含多个中和抗原表位，可诱导机体产生保护性中和抗体［5-7］。目前，对于DVH尚无有效的药物治疗措施，免疫接种仍是预防该病的主要措施，但普遍存在安全性低、免疫效果不够理想等缺点，并且变异毒株的出现使其免疫失败也逐渐增多，迫切需要开发DVH的新型疫苗。鉴于此，利用昆虫细胞－杆状病毒表达系统表达DHAV－ⅠSH株的VP1基因，以期表达出具有免疫原性的VP1重组蛋白，为DVH基因工程亚单位疫苗的研究奠定基础。
