廖垠林 黎明（通讯作者）

（1达州市中心医院口腔科 四川 达州 635000）（2昆明医科大学附属口腔医院 云南 昆明 650031）

粘液表皮样癌是最常见的涎腺恶性肿瘤，在涎腺上皮性恶性肿瘤中约占30%[1]。本研究采用免疫组化SP法检测CD147蛋白在粘液表皮样癌组织中的表达，探讨其临床病意义。

1.标本来源

收集1991年1月—2011年3月在昆明医科大学附属口腔医院口腔颌面外科行手术切除后的涎腺组织存档的石蜡切片标本，共52个，其中，涎腺粘液表皮样癌组织32例，正常涎腺组织20例。涎腺恶性肿瘤发生于大涎腺者（腮腺、颌下腺及舌下腺）24例，发生于小涎腺者（腭腺、唇腺、颊腺及磨牙后腺）8例；年龄14～78岁，平均46岁；肿瘤直径≤2cm者20例，＞2cm者12例；伴有癌细胞侵润周围组织者25例，伴有淋巴结转移者7例。

1.2 主要试剂

兔抗人CD147多克隆抗体，购自北京博奥森生物技术有限公司，超敏链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接法(S-P法)免疫组化试剂盒：购自福州迈新生物技术开发公司；

1.3 实验方法

免疫组织化学染色方法（VltrasensitiveTM S-P免疫组化）依据试剂盒说明书进行。取冻存的部分涎腺肿瘤组织行石蜡包埋，石蜡块作4μm 切片供免疫组织化学染色。SP免疫组织化学法检测涎腺肿瘤标本中CD147的表达，CD147抗体浓度配制为原浓度的1/300倍。以PBS代替一抗作为阴性对照。用PBS代替一抗作为阴性对照。

1.4 判断标准

HE染色切片由两名病理科主任医师读片证实诊断，在带有moticam2005医学图像分析系统的显微镜下观察并采集图像，每例随机观察高倍镜下200个肿瘤细胞，CD147阳性表达根据阳性细胞染色程度和百分率进行半定量结果判定。……