黄兰淇 ，张正炜 ，陈 秀 ，尹 军

（1.上海市农业技术推广服务中心，上海 201103；2.上海市浦东新区农技推广中心，上海 201201）

我国是水稻生产大国，常年水稻种植面积约为3 000万hm2[1]。水稻上已登记的常用农药有效成分有阿维菌素、氯虫苯甲酰胺、嘧菌酯、噻嗪酮、茚虫威等，5种农药单剂或复配制剂可有效防治稻纵卷叶螟、二化螟、飞虱、稻瘟病等病虫害。我国农药使用量大，其中大部分农药最终进入土壤环境，土壤环境污染严重。随着人们环境保护意识的逐渐增强，土壤和水环境的安全越来越受到重视。因此，有必要针对稻田土和水建立多残留检测方法。

上述5种农药的主要检测方法有液相色谱、气相色谱、液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）检测方法[2-10]。王思威等[2]采用甲醇提取稻田土中氯虫苯甲酰胺，经弗罗里硅土固相萃取净化，液相色谱串联质谱测定。谢惠等[3]分别用二氯甲烷和丙酮提取稻田水、土中嘧菌酯，气相色谱测定。何红梅等[4]分别采用乙腈振荡提取和乙酸乙酯液液分配提取稻田土和水中阿维菌素，经C18固相萃取小柱净化后，UPLC-MS/MS检测。目前未见高效液相色谱-串联质谱法同时检测稻田土和水中上述5种农药的报道。本文中稻田土采用乙腈振荡提取1 h，离心过膜后直接进样；稻田水采用二氯甲烷萃取，甲醇定容后直接过膜进样。对比文献[2-4]，本方法缩减了样品净化步骤，且减少了大量溶剂的使用，节省了分析时间和成本。

本文旨在高效液相色谱-串联质谱技术基础上，建立一种科学、快速、简便的残留检测方法，同时满足定性和定量的要求，为合理规范用药提供技术支持。

1 材料与方法

1.1 仪器设备与试剂

Agilent 6460三重四级杆液相色谱-质谱联用仪，美国Agilent公司；SHA-C恒温振荡器，常州国华电器有限公司。阿维菌素标样、氯虫苯甲酰胺标样、嘧菌酯标样、噻嗪酮标样、茚虫威标样（99%），由上海市农药研究所提供；乙腈、甲醇（色谱纯）。

1.2 实验方法

1.2.1 液相色谱条件

色谱柱：Poroshell 120 EC-C18（3.0 mm×100 mm，2.7 μm）；柱温：30℃；进样体积：2.0 μL；流动相：A相为0.1%甲酸水溶液，B相为甲醇；流速：0.4 mL/min。梯度洗脱程序：0～1 min，5%B；1～5 min，5%～50%B；5～10 min，50%～95%B；10～15 min，95%B。

1.2.2 质谱条件

质谱条件：可加热的ESI源，多反应监测模式（MRM），正离子扫描；进样体积：2 μL；干燥气温度：300℃；干燥气流量：7 mL/min；雾化气压力：0.28 MPa；鞘气温度：350℃；鞘气流量：11 mL/min；其他质谱参数见表1。

1.2.3 样品前处理

称取10 g土壤样品至100 mL锥形瓶中，加入20 mL乙腈，在恒温振荡器上振荡1 h，转入离心管中离心3 min后静置，制成待测液。

准确量取稻田水50 mL，分别用30 mL、10 mL、10 mL二氯甲烷萃取3次。分出下层有机相，置于旋转蒸发仪浓缩近干，甲醇定容至5 mL，制成待测液。

上述待测液无需净化，吸取2 mL直接过0.22 μm滤膜后于进样小瓶保存，待测。

表1 质谱检测参数表

2 结果与讨论

2.1 标准曲线绘制

准确称取阿维菌素等5种农药标样10 mg（精确至0.01 mg），用甲醇溶解并定容至10 mL，配制成质量浓度1 000 mg/L的标样母液。

取适量的标样母液用甲醇稀释成质量浓度0.005～1.0 mg/L系列标样溶液，并进样检测。以相应农药标样溶液质量浓度为横坐标，对应峰面积为纵坐标，进行线性回归。

在0.005～1.0 mg/L质量浓度范围内，阿维菌素等5种农药峰面积与质量浓度呈良好线性关系（见表2）。5种农药基质标样（0.01 mg/L）的总离子流图如图1所示。

表2 5种农药线性关系

图1 5种农药总离子流图

2.2 基质效应

基质效应（Mi）是指从样品中与目标物同时提取出来的共萃物在分析时对目标物分析产生的影响和干扰，包括基质减弱和增强效应。基质效应通常与基质种类、色谱分离条件、目标分析物特性等诸多因素有关，可以按照下式进行量化评价[11]。

｜Mi｜＜20%，为弱基质效应，可忽略，无需采取补偿措施；20%≤｜Mi｜≤50%，为中等程度基质效应；｜Mi｜＞50%，为强基质效应。中等程度基质效应和强基质效应需要采取补偿措施，通常采用的方法有基质匹配标样溶液校正法和样品稀释法。

配制低、中、高3种质量浓度（0.01 mg/L、0.1 mg/L、1.0 mg/L）基质标样溶液，以及甲醇配制的同质量浓度的纯溶剂标样溶液，按上述公式进行基质效应评价，结果见表3。

表3 5种农药基质效应参数

结果表明，5种农药在质量浓度为0.1 mg/L和1.0 mg/L时，｜Mi｜＜20%，基质效应可忽略；而在低质量浓度0.01 mg/L时，20%≤｜Mi｜≤70%，出现中等及以上程度基质效应，需要基质标样溶液校正。因此，本文稻田土中低浓度添加回收率采用基质标样溶液校正定量。

2.3 添加回收率

采用空白样品添加法测定5种农药回收率。分别向土壤、水中添加一定体积的阿维菌素、氯虫苯甲酰胺、嘧菌酯、噻嗪酮、茚虫威标样，使其质量浓度为0.02,0.2,1.0 mg/L，按照上述方法进行处理。在0.02～1.0 mg/L范围内，稻田土和水中阿维菌素回收率分别为82.89%～100.75%、87.55%～105.91%；变异系数分别2.63%～6.98%、2.75%～8.11%。氯虫苯甲酰胺回收率分别为96.71%～105.03%、91.72%～97.49%；变异系数分别为2.25%～4.20%、1.80%～2.82%。嘧菌酯回收率分别为107.23%～110.20%、91.66%～110.69%；变异系数分别为2.58%～5.83%、1.51%～8.83%。噻嗪酮回收率分别为106.58%～108.43%、94.28%～96.66%；变异系数分别为0.95%～4.94%、1.81%～3.31%。茚虫威回收率分别为109.95%～118.12%、94.33%～106.37%；变异系数分别为1.97%～7.36%、1.12%～9.37%（见表4）。结果表明，该方法达到农药残留分析要求。

表4 稻田土及水中阿维菌素等5种农药的添加回收结果

3 结论

本文建立了稻田土和水中阿维菌素、氯虫苯甲酰胺、嘧菌酯、噻嗪酮、茚虫威等5种农药残留高效液相色谱-串联质谱检测方法。稻田土采用乙腈作为提取溶剂，振荡提取1 h，离心后直接过膜检测。稻田水经二氯甲烷萃取，浓缩后甲醇定容直接过膜检测。稻田土和水中各农药的回收率和变异系数均符合农药残留试验要求。该方法无净化步骤，具有分析速度快，操作简单，准确等优点，达到稻田土、水中5种农药残留分析检测的要求。

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[2]王思威,孙海滨,刘艳萍.氯虫苯甲酰胺颗粒剂在水稻环境中的残留行为与合理使用评价[J].农药,2013,52(12)：899-902.

[3]谢惠,龚道新.嘧菌酯在稻田水、土壤及水稻植株中的残留降解行为研究[J].湖南农业科学,2013(1)：80-83.

[4]何红梅,赵华,张春荣,等.超高效液相色谱-串联质谱法测定水稻基质中阿维菌素残留量[J].分析化学,2012,40(1)：140-144.

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