戴志敏　杨占珍　闭珏　王芳

【摘 要】目的：通过血清胸苷激酶（STK1）的检测，评估其在该地区健康体检人群中的应用价值。方法：采用高灵敏度点印染/免疫增强发光检测系统（ECL）对我院967例健康体检人群的STK1浓度检测，分别对各年龄阶段、性别之间的检测结果进行分析研究。结果：STK1测定值以2pmol/L为标准阈值，>2.0pmol/L为阳性，≤2.0pmol/L为阴性。（1）STK1在健康体检人群中的阴性者（909/967），平均值为（0.43±0.39）pmol/L，阳性者（58/967），阳性率为6.4%，平均值为（6.14±4.14）pmol/L（T=-10.51，P<0.05）。（2）男性检出阳性率为5.8%，平均值为（0.72±1.62）pmol/L，女性检出阳性率为7.2%，平均值为（0.85±1.89）pmol/L（x?=3.52，P>0.05），（3）将年龄分为三个阶段（青年：≤45岁、中年：46-59岁、老年：≥60岁），STK1的阴性组和阳性组与年龄阶段之间的两两比较，差异无统计学意义（x?=0.315，P>0.05）。（4）TK1表达的阳性的58例中，癌前病变12人，占20.7%，良性肿瘤10人，占17.2%，其他非肿瘤增殖性疾病21人，占36.2%，其他疾病15人，占25.9%，男性随年龄增大TK1的阳性率呈增长趋势，女性随年龄增长呈下降趋势。结论：TK1可真实反应体内细胞异常增殖情况，其水平与细胞增殖呈正相关，可对细胞异常增殖疾病发生的风险进行评估，在肿瘤的早期发现有重要的应用价值，可作为健康体检人群的癌前病变筛查。

【关键词】 黔东南州，血清胸苷激酶1，健康人群，体检

【中图分类号】R446.11 【文献标识码】B 【文章编号】1005-0019（2018）23--01

TK1与细胞周期S期的特殊相关性，又被称为“S”期关键酶[1]，与细胞增殖有关，其水平随着细胞快速增殖而逐渐增加，处于过度增殖的增殖类疾病是肿瘤形成的第一步。胸苷激酶1（TK1）基于与细胞增殖的密切关系，能够灵敏地检查出TK1浓度的变化，可以及时提示体内癌前病变是否已出现恶性进展。常规抽血检查就可实现多种治疗方案（如手术、化疗、放疗及生物治疗等）的前后体内细胞增殖的活动能力，血清TK1与其他常用肿瘤标记联合检测时，可明显提高肿瘤早期诊断的敏感性及特异性[2]。

黔东南州地區少数名族居多，以侗族苗族为主，在饮食、生活习惯、生活环境等方面都与其他地区健康人群有所不同，因此我们针对该地区在我院健康体检管理中心体检的健康人群的血清胸苷激酶1（STK1）测定结果进行分析，评估其在该地区健康体检人群中的临床应用价值。

本次通过对黔东南州地区健康体检中心967例健康体检人群的血清胸苷激酶1的检测结果进行分析，研究在不同性别、年龄阶段的STK1浓度，探讨其在该地区健康体检中的检测意义，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 对象 选择2017年1月至2017年12月本地区到我院进行TK1检测的体检者共967例为研究对象，其中男性582例，女性385例，年龄18-88岁。应排除标本溶血、脂血，女性月经期等情况。

1.2 方法

1.2.1 标本采集：使用无添加剂的真空采血管取静脉血2ml，建议空腹，室温静置30-60min或水浴30min至凝固后离心，以4000r/min，5min，离心后保存于-20℃冰箱备用。

1.2.2 试剂和仪器：深圳华瑞同康生物科技有限公司提供的STK1诊断试剂盒和CIS-1型化学发光数字成像分析仪。

1.2.3 检测方法：采用高灵敏度点印染/免疫增强发光检测系统（ECL）进行检测，详细操作步骤按诊断试剂盒操作手册进行。吸取3ul的体检者血清到硝酸纤维素膜上，加入TBS缓冲液配置的6%脱脂奶粉，将硝酸纤维素膜于室温封闭1h后除去封闭剂，继续加入用TBS配置的最佳稀释浓度的TK1抗体室温下免疫反应2h。再加生物素化二抗（生物素化-驴抗鸡IgY），室温下反应40min后，加入亲和素辣根过氧化物酶1h。用ECL发光试剂反应后，发光信号的强弱用CS-1成像系统进行分析。每次测定均采用不同浓度IK1（20pmo/L、6.6pmo/L，2.2pmo/L）做标准品制定标准曲线，依据已知的标准品的浓度，每个点样点的发光信号的强度换算成pmoL，STK1水平超过2.0pmoL定为阳性。体检者同时进行全面检查：包括体格检查、血生化检验、影像学检查（如胸部正侧位片和腹部B超）等。

1.3 统计学处理 采用SPSS 22.0软件进行统计，计量资料组间比较就采用独立样本t检验方法，用（）表示，计数资料组间比较采用x?检验方法，P<0.05为有统计学意义。

2 结果

2.1 TK1的正常组和风险组间的相关性TK1的风险组平均值与正常组的平均值有统计学差异（T=-10.51，P<0.05）。

2.2 TK1正常组和风险组与性别间的相关性 TK1在男性和女性之间的平均值无差异（x?=3.521，P=0.061）。如表2：

2.3 TK1正常组和风险组与年龄之间的相关性 TK1在各年龄组阶段的平均值无差异（x?=0.315，P=0.854）。如表3。

2.4 TK1的表达与疾病的相关性 TK1表达的阳性的58例中：（1）癌前病变12人，占20.7%，其中子宫颈炎伴宫颈糜烂为3人，结肠息肉为4人，慢性萎缩性胃炎为3人，乳腺非典型增生为2人。（2）良性肿瘤10人，占17.2%，其中甲状腺瘤为2人，子宫肌瘤为4人，肝囊肿为2人，肝血管瘤为2人。（3）其他非肿瘤增殖性疾病21人，占36.2%，乳腺叶增生10人，前列腺增生为11人。（4）其他疾病15人，占25.9%，其中包括心血管病，糖尿病，女性月经期等等。

3 讨论

现目前有很多种方法可以检测到肿瘤细胞，比如影像学、免疫组化、CT等都可以较好的测出肿瘤细胞。但是这些方法只能对已经形成实质性肿瘤块细胞进行识别，不能对早期潜伏在机体内的癌细胞进行监测，只适用于癌症中晚期的患者，会导致病人不能及时治愈。而血清胸苷激酶1中的胸苷激酶抗体是随着体内细胞异常增殖而随之增加，呈一个正相关的关系，所以当机体内有细胞异常增殖的时候，那么TK1的浓度水平也会跟着升高，而正常细胞增殖的时候TK1不会或者极低释放到血液中，血清中TK1浓度极低[3]。TK1对于一些及早潜伏在机体内的肿瘤细胞可以进行瞬时捕获，不仅特异性高，而且灵敏度也更好。当然也不能排除一些非肿瘤增殖性疾病而引起的胸苷激酶增高，比如乳腺增生，前列腺增生，糖尿病等血清TK1浓度也会增高，还有女性月经期、病毒感染、炎症会导致TK1一过性增高，TK1的浓度也会受标本自身的影响，比如溶血，脂血等也会导致一些假阳性的结果出现。

有研究应用血清TKl作为健康体检人群筛查肿瘤的风险，Xu等[4]对癌前病变組与健康体检组比较后结果显示，TKl检测的灵敏度和特异度均适用于体检筛查。

本次研究对黔东南州地区健康体检中心的967例体检人群进行结果检测，阳性率为6.4%，高于陈志恒等[5]1.20%的结果及张兴华等[6]5.8%的结果。TK1检测结果在男女之间比较无统计学意义，与刘影[7]等报道结果一致，在各年龄阶段两两比较也无统计学意义，与宋成等[8]报道结果一致。由于本地区的少数名族居多，可能在职业、生活习惯、生活环境、饮食方面都与其他地区的健康人有所不同，如本地区的人有喜欢饮酒、抽烟的习惯，而且这次收集的数据阳性者中有12人为癌前病变，良性肿瘤的有10人，其他非肿瘤增殖性疾病为21人，还有一些其他自身疾病的有15人，故阳性率会远大于其他地区的健康体检人群，而对于TK1阳性者应该排除脂血、溶血等情况。

对本次研究的血清TK1（STKI）的检测结果进行分析，表明了TK1可以真实评估机体内细胞异常增殖的情况，是一个特异性、敏感性极好的肿瘤标记物，可以瞬时捕获到肿瘤细胞。其水平与细胞增殖速度呈正相关，可对细胞异常增殖疾病发生的风险进行评估，在肿瘤的早期发现有重要的应用价值，尤其适合癌前病变体检筛查，可以帮助患者早发现、早诊断、早治疗。

参考文献

Sherley Kelly TJ.Regu lation of human thymidine kinase during thecel lcycle[J].JBidChem，1988，263：58.

李伟，梁建波，韦华玉，等应用荧光原位杂交技术诊断尿路上皮癌的临床研究[J].中国癌症杂志，2010，20（1）：452‐453.

Roberts BVClearyEG，RobertsJv.Graded check lists to assist undergraduate studentsinself.directed 1earning and assessmentin generaland systematic anatomical pathology[J].patholo9lgy 1997，29（4）：370-373.

Xu XH，Zhang YM.ShuXH，et a1.Serum thymidine ki—nase 1 reflects the progression of premalignant and malig—nanttumor during therapy[J].Mol Med Rep，2008，1（5）：705—711.

陈志恒，王雅琴，朱小玲，等.血清胸苷激酶1在健康体检中的应用[J].中华健康管理学杂志，2011，5（6）：349—352.

张兴华，杨金荣，秦雷，等.血清胸苷激酶1（S-TKl）对癌前疾病癌变风筛查意义——吉林油田8869健康体检筛查调查报告[J].中华健康管理学杂志，2010，4（1）：35—38.

刘影，李笑玉，林伟等.6436例健康体检者血清胸苷激酶1测定结果分析[J].检验医学与临床，2016，13（11）：1672-1675.

宋成，施玉泉等.血清胸苷激酶（TK1）对健康体检人员中进展期癌前病变风险进程的跟踪研究[J].2014，25（5）：1670-1672.