窦 勇， 姚妙爱

(江苏财经职业技术学院，江苏淮安 223003)

黄颡鱼(Pelteobagrusfulvidraco)俗名黄角丁、黄腊丁、戈牙等，隶属鲿科(Bagride)、鲇形目(Silurformes)、黄颡鱼属(Pelteobagrus)，广布于我国东部各大水系，是目前经济价值较高的淡水养殖新品种之一[1-4]。研究表明，黄颡鱼对蛋白质的需求量基本在33.5%～45.0%，人工养殖条件下可全程摄食颗粒料或膨化配合饲料[5-6]。我国早期养殖黄颡鱼以颗粒料为主，饲料的蛋白质含量高达44%～45%，造成高蛋白质饲料浪费，并对养殖水体和环境造成巨大污染。随着饲料膨化技术的发展，黄颡鱼膨化饲料逐渐研发使用，但其蛋白质含量仍高达42%，存在蛋白质资源浪费现象。

目前，在配合饲料中添加酶制剂，成为提高水产动物对饲料营养成分消化吸收的有效途径之一。复合酶制剂由多种可以分解饲料营养分子链的生物活性物质组成，可最大限度地提高饲料营养成分的消化分解，解除饲料中多种抗营养因子，补充内源性消化酶分泌的不足，提高动物对营养成分的消化吸收，促进动物生长和提高饲料效率[7]。由于鱼类饲料加工多数采用制粒或膨化，特别是饲料膨化过程中温度高达 150 ℃，加工过程对酶的活性影响较大，限制了酶制剂在生产上的应用。此外，黄颡鱼适宜生长温度在25 ℃左右，但大多数酶制剂活性最适温度为30～50 ℃，黄颡鱼养殖过程中酶活性达不到最适温度。因此，在黄颡鱼膨化饲料中很少使用酶制剂，为此本研究采用先制粒后喷涂的方式添加复合酶制剂，待膨化后饲料温度降低至80 ℃左右，由油脂稀释酶制剂后进行喷涂，可有效提高复合酶制剂活性。为研制高效环保型黄颡鱼膨化饲料，降低黄颡鱼膨化饲料中蛋白质添加量，有效提高蛋白质利用率，降低黄颡鱼养殖过程中N排放量，在黄颡鱼膨化饲料中添加水产专用复合酶制剂，基于黄颡鱼最适能蛋比33.5～37.5 MJ/kg情况下，研究不同粗蛋白质添加量对黄颡鱼生产性能、氮元素吸收的影响，以期获得在不影响黄颡鱼生长性能情况下，膨化饲料中最低蛋白质用量，为成功研制环保型黄颡鱼膨化饲料奠定基础。

1 材料与方法

1.1 试验用鱼

黄颡鱼由扬州市董氏特种水产苗种繁育中心提供，体质量8～9 g/尾，试验前驯养15 d，淘汰体质差及环境不适应个体。

1.2 试验材料

水产专用耐高温复合酶制剂(513A)购于武汉新华扬生物股份有限公司，其中蛋白酶≥4 500 U/g，木聚糖酶 ≥12 000 U/g，β-甘露聚糖酶≥100 U/g，纤维素酶 ≥200 U/g。

水产专用耐高温微生态制剂(微特赢)购于上海三智生物科技有限公司，主要菌种为地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌，总活菌数≥100×108CFU/g。

1.3 日粮配方组成

基于黄颡鱼最适能蛋比33.5～37.7 MJ/kg情况下，饲料粗蛋白质含量依次设置为36%、37%、38%、39%、40%、41%、42%、43%，其中对照组不添加复合酶制剂(设置为1～8组)，试验组添加0.02%复合酶制剂(设置为Ⅰ～Ⅷ组)。试验组和对照组均添加0.02%的微生态制剂，酶制剂和微生态制剂均在制粒与豆油混合后进行喷涂添加。通过调节凹凸棒土、豆油、豆粕及国产鱼粉用量来调整饲料能蛋比及蛋白质含量，研究低蛋白质膨化日粮下，添加复合酶制剂对黄颡鱼生长性能及氮排放的影响，膨化饲料配方及营养水平见表1、表2。

1.4 试验方法

1.4.1 流水试验[8-9]试验在淮安正昌饲料有限公司养殖实验中心进行，长方形恒温水族箱规格“长×宽×高”为“160 cm×70 cm×80 cm”，选择体质健壮、大小基本一致的黄颡鱼幼苗，每箱投放30尾，每种饲料设置3个重复，共48箱。采用恒温循环水养殖系统，水温控制在(24.0±0.5) ℃，溶氧量保证在6 mg/L以上，氨氮含量≤0.02 mg/L，pH值约为7.2。饲料投喂量根据鱼体质量及驯养时实际摄食量确定，为体质量的4.0%～4.3%(以摄食完为准)，每2周称质量1次，并调整投饲量。每日投喂3次，时间为08：00、13：00、18：00，投喂2 h后吸出残饵。在早晨(投饵前)、晚上(20：00)各吸粪1次，保持养殖水体清洁。试验时间自2016年5月2日至2016年6月26日结束，共养殖8周，记录初均体质量、末均体质量、总投饵量、总残饵量、末均体长，计算各试验组体质量增长率、饲料系数及肥满度。

表1 黄颡鱼膨化饲料试验配方 kg

表2 黄颡鱼膨化饲料营养水平

1.4.2 静水试验[10-11]流水养殖8周后，于2016年6月27日进行静水养殖试验。将鱼按照组别转移至相同规格的长方形恒温水族箱，加等量新曝气后的水，投喂饲料改换成含有0.5% Cr2O3的饲料，试验组与对照组投喂量相同。养殖条件与流水养殖相同，投喂2 h后用虹吸法收粪便，于65 ℃干燥，合并每次收集的粪便，粉碎后装瓶备用。

1.4.3 指标测定 饲料及粪便中粗蛋白质含量采用凯氏定氮法(GB/T 6432—1994)测定，粗脂肪含量采用索氏抽提法(GB/T 6433—2006)测定，粗纤维含量采用过滤法(GB/T 6434—2006)测定。饲料及粪便中Cr2O3含量采用原子吸收法测定。

(1)

(2)

(3)

表观消化率=(1-C1P2/C2P1)×100%。

(4)

式中：C1和C2分别为饲料和粪便中的Cr2O3的含量(%)；P1和P2分别为饲料和粪便中的某营养成分的含量(%)。

1.5 数据处理方法

用PASW 18.0软件对数据进行分析，采用“平均值±标准差”表示。

2 结果与分析

2.1 复合酶制剂对黄颡鱼生长性能的影响

由表3可知：(1)对照组别中的各组初均体质量差异不显著，与第1组相比，第2～4组的末体均质量、体质量增长率、肥满度随粗蛋白质含量增加而显著增加(P<0.05)，饲料系数显著降低(P<0.05)，且从第5组开始末均体质量、体质量增长率极显著增加(P<0.01)，饲料系数极显著降低至1.31(P<0.01)，5～8组各生长性能指标变化不显著(P>0.05)。说明在不添加复合酶制剂情况下，膨化饲料粗蛋白质含量达到40%以上时，黄颡鱼可达到最佳生长状态，随蛋白质含量的继续升高，生长性能提高不明显。当膨化饲料粗蛋白质含量低于40%，黄颡鱼生产性能受到显著影响，随着粗蛋白质含量减少而逐渐变差。因此，在不添加复合酶制剂情况下，膨化日粮中的粗蛋白质含量不得低于40%。(2)试验组别各组初质量差异不显著，与第Ⅰ组相比，第Ⅱ组末均体质量、体质量增长率、肥满度随粗蛋白质含量增加而显著增加(P<0.05)，饲料系数显著降低(P<0.05)，从第Ⅲ组开始末均体质量、体质量增长率、肥满度极显著增加(P<0.01)，饲料系数极显著降低(P<0.01)，第Ⅳ～Ⅷ各生长性能指标差异不显著(P>0.05)。说明添加复合酶制剂，膨化饲料粗蛋白质含量达到38%以上时，黄颡鱼可达到最佳生长状态，即粗蛋白质含量可降低至38%，其生产性能不会受到显著影响，但低于此粗蛋白质含量其生长性能显著降低(P<0.05)。因此，在添加复合酶制剂情况下，膨化日粮中的粗蛋白质含量可降低至38%，与对照组不添加复合酶制剂相比，饲料系数由1.31降低至1.11，降低了15.27%；体质量增长率由617.33%提高至896.61%，提高了45.24%。

表3 复合酶制剂对黄颡鱼生长性能的影响

由上述分析可见，在最适能蛋比情况下，膨化饲料中添加0.02%复合酶制剂，可以显著提高黄颡鱼的增质量率、降低饲料系数，提高生产性能，且膨化饲料中粗蛋白质含量可降低至38%，不影响黄颡鱼的生长性能。

2.2 复合酶制剂对黄颡鱼营养物代谢及氮排放的影响

由表4可知：(1)添加复合酶制剂对黄颡鱼营养物表观消化率及氮排放影响显著。(2)对照组的粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维的表观消化率从第5组开始显著升高(P<0.05)，这可能由于蛋白质含量低于40%时，氨基酸不能满足黄颡鱼正常生长需求，降低了黄颡鱼消化酶的分泌，从而影响了营养物表观消化率。当粗蛋白质含量达到40%以上时，黄颡鱼生长性能恢复正常，粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维表观消化率也显著提高(P<0.05)。试验组的粗蛋白质、粗脂肪和粗纤维的表观消化率第Ⅱ～Ⅷ组均比第Ⅰ组极显著升高(P<0.01)，第Ⅳ～Ⅷ组各营养物表观消化率变化不显著(P>0.05)；这说明添加复合酶制剂有效提高了粗蛋白质、粗脂肪及粗纤维的表观消化率，这可能由于复合酶制剂中含有蛋白酶、纤维素酶等多种酶，促进营养物质的消化。(3)就粪氮排放量来说，对照组从第5组开始极显著降低(P<0.01)，而试验组从第Ⅲ组开始极显著降低(P<0.01)。试验组极显著低于对照组(P<0.01)，原因可能是试验组复合酶制剂中蛋白酶促进了粗蛋白质的消化吸收。(4)对于水中氮排放量来说，对照组和试验组的排放量均较少，且差异不显著。这可能与收集粪便及时有关，但添加复合酶制剂试验组显著低于对照组(P<0.05)。

表4 复合酶制剂对黄颡鱼营养物表观消化率及氮排放量的影响

添加复合酶制剂的试验组从第Ⅲ组粗蛋白质、粗脂肪和粗纤维表观消化率分别升高至90.25%、64.43%、51.37%，相对于未添加复合酶制剂的对照组5组的69.23%、56.37%、40.15%，粗蛋白质表观消化率提高了23.29%，粗脂肪表观消化率提高了12.51%，粗纤维表观消化率提高了21.84%。粪氮排放量试验组约0.44 g/箱相对于对照组约2.0 g/箱，极显著降低了78.00%(P<0.01)，而水中氮排放量试验组约 0.10 mg/L 相对于对照组约0.17 mg/L，极显著降低了 41.18%(P<0.01)。总体来看，黄颡鱼膨化饲料中添加 0.02% 的复合酶制剂有效提高了粗蛋白质、粗脂肪及粗纤维的表观消化率，减少了环境氮排放量。

3 结论

试验结果表明，适量降低膨化配合日粮中粗蛋白质含量，采用后喷涂的方法添加耐高温复合酶制剂，可有效提高黄颡鱼的营养物表观消化率，并提高黄颡鱼生长性能。研究表明，在最适能蛋比33.5～37.7 MJ/kg条件下，黄颡鱼膨化饲料添加0.02%复合酶制剂及0.02%微生态制剂，饲料粗蛋白质含量可降低至38.00%，不影响黄颡鱼生长。添加复合酶制剂试验组粪氮排放量相对于未添加复合酶制剂对照组极显著降低78.00%(P<0.01)，而水中氮排放量相对于对照组极显著降低41.18%(P<0.01)。因此，向黄颡鱼膨化饲料中添加复合酶制剂，可有效提高黄颡鱼生长性能，提高粗蛋白质利用率，减少环境中氮排放量，保护生态环境。