隋晓丹

（长春中医药大学附属医院肝脾胃病科，吉林 长春 130021）

非酒精性脂肪肝病（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）发病率呈逐年上升趋势，已成为21世纪全球重要公共健康问题之一。本实验通过观察肝脂溶颗粒对NAFLD大鼠胰岛素抵抗的影响，及胰岛素抵抗在NAFLD中的作用，并探明调节其作用的传导途径，为中医临床干预治疗非酒精性脂肪肝提供理论依据和新的思路。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 Wistar大鼠60只，雄性，体质量（200±20） g。

1.1.2 药物 肝脂溶颗粒：长春中医学院附属医院制剂室，批准文号：长卫制药字 (96)1367号。多烯磷脂酰胆碱胶囊：赛诺非安万特（北京）制药有限公司，批准文号：国药准字H20059010。

1.2 方法

1.2.1 非酒精性脂肪肝模型复制方法 大鼠适应环境1周后随机分为正常组9只、高脂组51只。正常组予普通饲料喂养，高脂组予高脂饲料（88%基础饲料、10%猪油、2%胆固醇）喂养，自由饮水。12周后随机选出7只大鼠（正常组1只，高脂组6只），处死后取肝脏组织进行HE染色，验证造模情况。

1.2.2 实验动物分组及给药方法 12周后，正常组大鼠普通饲料喂养同时每日生理盐水灌胃。高脂组大鼠随机分为模型组、多烯磷脂酰胆碱胶囊对照组（简称：对照组）、肝脂溶颗粒高、中、低剂量组（简称：高、中、低剂量组）。继续高脂饲料喂养同时每日给予不同药物进行灌胃（模型组：生理盐水灌胃1 mL/100 g；对照组：多烯磷脂酰胆碱胶囊水溶液灌胃，按0.14 g/kg体重给药；高剂量组：100%浓度肝脂溶颗粒水溶液灌胃，按3 g/kg体重给药；中剂量组：70%浓度肝脂溶颗粒水溶液灌胃，按2.1 g/kg体重给药；低剂量组：30%浓度肝脂溶颗粒水溶液灌胃，按0.9 g/kg体重给药），连续灌胃4周后取材。

1.2.3 血标本采集 以2%戊巴比妥钠溶液腹腔内注射麻醉，腹主动脉采血4～5 mL，分离血清，置于－20℃冰箱保存备用。

1.3 观察指标 血清空腹血糖 (FBG)及空腹胰岛素(FINS)的检测；FBG测定：采用全自动生化分析仪；FINS测定：采用放射免疫方法，125I-胰岛素放免分析试剂盒。

1.4 血清HOMA-IR计算方法 根据推荐公式计算胰岛素抵抗指数：HOMA-IR=FINS×FBG/22.5。

1.5 统计学方法 采用SPSS 16.0统计软件处理数据，计量资料以均数加减标准差（）表示。

2 结果

实验16周末各组NAFLD大鼠空腹血糖、胰岛素和IR均明显高于正常组（P＜0.01），差异有显著统计学意义；而模型组大鼠空腹血糖、胰岛素和IR最高，明显高于各药物干预组（P＜0.01），差异有显著统计学意义；高剂量组大鼠空腹血糖、胰岛素和IR明显低于对照组（P＜0.01），差异有显著统计学意义；中剂量组大鼠空腹血糖、胰岛素和IR低于对照组（P＜0.05），差异有统计学意义；低剂量组大鼠空腹血糖、胰岛素和IR与对照组相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。说明肝脂溶颗粒能够明显改善NAFLD大鼠胰岛素抵抗水平，疗效显著优于多烯磷脂酰胆碱胶囊。见表1。

表1 各组大鼠16周末血清FBG、FINS、IR比较 （）

注：与正常组相比，*P＜0.01，**P＜0.05；与模型组相比，ΔP＜0.01，ΔΔP＜0.05；与对照组相比，＆P＜0.01，#P＜0.05，##P＞0.05

IR 1.74±0.32 6.98±1.19*5.86±0.51*Δ 1.98±0.48*Δ＆3.91±0.76*Δ#5.34±0.27*Δ##组别 只数 FBG（mmol/L） FINS（uIU/mL）正常组模型组对照组高剂量组中剂量组低剂量组8 9 8 9 8 9 4.63±1.52 12.04±1.47*10.92±0.93*Δ 5.47±0.93*Δ＆8.31±1.75*Δ#10.26±1.84*Δ##7.98±0.45 13.06±0.73*12.07±0.38*Δ 8.48±0.62*Δ＆10.68±0.56*Δ#11.75±0.21*Δ##

3 讨论

IR指肝脏、肌肉、外周脂肪组织对胰岛素的敏感性及反应性降低，胰岛素的生物学效应下降。IR是NAFLD发生过程中的始动因素和重要因素[1]，IR是肝脏脂肪贮积的首要原因，它不仅参与了首次打击，还参与了二次打击[2]，并且IR的严重程度与NAFLD的病情进展及预后密切相关[3]。

IR主要通过脂肪分解作用和高胰岛素血症两种机制导致肝细胞脂质沉积。IR可减弱胰岛素对脂肪的调节作用，导致外周脂肪的分解增加和血清游离脂肪酸的增多，当肝脏内合成脂肪增加到一定程度，超过了肝细胞氧化利用及合成脂蛋白运送的能力时，便会导致肝细胞内过多脂肪的堆积。脂肪酸具有肝细胞毒性，不仅能够通过引起线粒体肿胀并增加其通透性，炎性浸润，肝细胞变性、坏死而诱导细胞凋亡，同时还能够刺激胰岛β细胞增加胰岛素的分泌，进而产生或加重高胰岛素血症。

IR时胰岛素的生物学效应下降导致高胰岛素血症，引起糖降解和脂肪酸的合成增加、ApoB-100的合成减少而加重甘油三酯的储积。而各种原因所致的脂肪肝均可以促进胰岛分泌胰岛素，同时肝细胞脂肪堆积又可以导致胰岛素清除率下降，从而形成脂肪肝与胰岛素抵抗的恶性循环。此外，IR还可以通过刺激微粒体的脂质过氧化物酶而易使肝脏发生氧化应激。范建高等[4]研究证实几乎所有NAFLD患者都存在肝脏和外周胰岛素抵抗，并且不依赖于肥胖、糖耐量异常和糖尿病。

刘铁军教授总结多年治疗非酒精性脂肪肝的临床经验，依据《临证指南医案·湿》云：“而但湿从内生者，必其人膏粱酒醴必度。”非酒精性脂肪肝的发病多因嗜食肥甘厚味导致损伤脾胃，运化失司，湿热内蕴，伤及肝胆，疏泄失职，导致气机郁滞，血脉瘀阻，痰浊瘀积，肝脏脉络受阻，湿热瘀积互结于肝而成脂肪肝。自研肝脂溶颗粒[5]，由决明子、枳椇子、泽泻等组成。诸药合用，消而不伐，补而不滞，寒温并用，药性平和，共奏清热利湿、化瘀消积之功效。本实验结果表明肝脂溶颗粒能够提高胰岛素的敏感性，改善胰岛素抵抗，恢复正常糖脂代谢，而达到预防脂肪肝的目的。其疗效与剂量呈正相关，且对胰岛素抵抗有治疗效果，且显著优于多烯磷脂酰胆碱胶囊。高脂饮食诱导致NAFLD大鼠血清IR显著增高，这可能是大鼠引起非酒精性脂肪肝的机制之一，肝脂溶颗粒显著降低了血清IR，因此，肝脂溶颗粒对非酒精性脂肪肝的防治作用，可能是通过改善胰岛素抵抗而完成的。