邓丽 向小聪 张若兰 刘康 冯刚

我国是食管癌的高发区，年平均死亡人数约15万，占全国肿瘤死亡率21.8%[1]，由于细胞侵袭、转移及耐药的产生使目前该病的主要治疗方法，即联合性的综合治疗，疗效不甚乐观，食管癌的死亡率处于很高的水平[2-4]。因此，探寻食管癌的发生机制、寻找其早期肿瘤标志物对于提高该病的早期诊断及治疗具有重要意义。肿瘤干细胞作为肿瘤细胞群体中数量极少且特殊的一部分细胞，它们有完成细胞自我更新及分化、成瘤性强和抗凋亡等特性，在肿瘤的发生、侵袭及转移中发挥重要作用[5]。肿瘤干细胞对临床上常用的放化疗极为敏感且耐受性强，因此它们是引起肿瘤复发及耐药性形成的重要原因之一，也是导致治疗最终失败的重要因素，因而如果能提出针对食管癌干细胞的基因治疗手段，就有望实现对食管癌的控制。

胚胎干细胞转录调控因子OCT3/4、SOX2以及NANOG等是维持干细胞自我更新、调控细胞分化的关键因素[6]。大量的实验数据表明，转录因子NANOG在乳腺癌等多种肿瘤干细胞中高表达，同时各功能性实验也证明了在多种肿瘤组织中NANOG的异常表达与肿瘤浸润、侵袭及转移密切相关[7-8]，但截至目前为止，它与食管癌干细胞自我更新间的关系还未见详细报道。因此，本研究拟通过悬浮培养法分离培养食管癌干细胞，并通过基因沉默技术研究NANOG的表达与食管癌干细胞增殖间的关系。

材料与方法

一、材料

NANOG1、2、NC-shRNA购自上海吉凯……