简文文，鱼 庆，王 敏，赵 柘，赵淑慧，汪宇佳，杨淑莉

(吉林大学第二医院 妇产科，吉林 长春130041)

卵巢恶性肿瘤致死率居于妇科恶性肿瘤首位[1]，由此人们对于卵巢癌的防治日益重视。TNF相关凋亡诱导配体即TRAIL属于肿瘤坏死因子TNF之一，能够有所针对性地促进肿瘤细胞凋亡，并且不会对健康组织造成明显的副作用[2]。山奈酚是一种具有抗癌、增强抗癌治疗效果等多种生物功能的黄酮类化合物[3]。卵巢恶性肿瘤以手术及化疗为主的辅助治疗为原则[1]。现阶段临床的辅助治疗手段因其副反应重及易致耐药性等原因而具有局限性，使得探索新型高效的抗癌治疗方案势在必行[4]。结合国内外相关文献及报道，深入探讨山奈酚致敏TRAIL诱导人卵巢癌细胞凋亡的相关机制，对于寻求新型辅助治疗方案以便改善卵巢癌患者预后具有重要意义。

1 TRAIL与死亡受体

1.1 TRAIL信号传导通路与死亡受体

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 (TRAIL) 信号传导通路是指以TRAIL为配体[5],通过与死亡受体 (DR4,DR5) 结合而启动细胞凋亡[6]从而达到治疗癌症的效果。TNF相关凋亡诱导配体即TRAIL属于肿瘤坏死因子TNF之一。1995 年,Wiley 等从心肌 cDNA 文库中克隆出 TRAIL 基因。后经研究证实， TRAIL 的 mRNA 广泛存在于各组织及器官。截至目前发现的TRAIL受体有5种： TRAIL-R1、TRAIL-R2、TRAIL-R3、TRAIL-R4 和 OPG,分为死亡受体和诱捕受体。死亡受体是 TRAIL 的功能型受体，分布广泛[7]。死亡受体具有死亡结构域由此可以传递死亡信号，当TRAIL与之结合时能够选择性地诱导相关靶细胞凋亡从而抑制对应的恶性肿瘤的发展与侵袭达到治疗癌症、维护机体健康的最终目的，死亡受体即TRAIL-R1 和 TRAIL-R2,又称为死亡受体 4 (DR4) 和死亡受体5 (DR5)。诱捕受体包括 TRAIL-R3、TRAIL-R4、OPG。因TRAIL-R1 和 TRAIL-R2与TRAIL传导通路紧密相关，本文着重讨论山奈酚致敏TRAIL与诱导人卵巢癌细胞凋亡的相关机制及前景，以期得到业界对相关领域的认知及重视。

1.2 TRAIL应用于癌症治疗的理论基础

研究表明：原发肿瘤中诱捕受体存在异常甲基化，死亡受体异常甲基化罕见。正常组织中所有受体的异常甲基化均罕见。肿瘤组织中DR4 和 (或) DR5的表达并不受抑制甚至增加,这就为以 TRAIL 及 DR4 或 DR5的靶向肿瘤治疗方案提供了依据[8]。TRAIL 能在对正常组织无明显杀伤作用的前提下诱导肿瘤细胞凋亡如肺癌、卵巢癌、结肠癌等,与此同时副作用罕见[9]为其将来可能广泛应用于临床奠定了相对安全的实践基础。重组的 rTRAIL 或有望研发为新型抗肿瘤细胞因子,现已进入临床研究，若将来得以适用于临床,将从源头遏制疾病的发展造福于广大罹患癌症的患者,具有划时代意义。然而值得注意的是，TRAIL 受体在肿瘤中的表达及分布是以死亡受体为靶点的治疗方案的重中之重，有数据显示，乳腺癌等在TRAIL的基因所在位置大多存在等位缺失，肺癌等存在TRAIL的突变[5]，10.3%的卵巢癌患者DR4不表达，8.8%的卵巢癌患者DR4表达下调。以上相关研究可以充分说明肿瘤与TRAIL存在关联，但是,TRAIL 受体在肿瘤中的表达及分布尚未完全明确，亟待进一步研究。若能将其对应关系研究透彻，将有助于针对不同的肿瘤疾病给予精准的靶向治疗，将有限的医疗资源发挥最大的作用，可以最大程度的避免错误治疗及过度治疗，达到提高治疗效果、减少医疗开支、改善患者预后的良好初衷。

1.3 TRAIL的抗癌协同性

不仅如此，TRAIL在可以安全高效抗癌的同时可以增强其他癌症治疗方案的疗效,不同抗肿瘤制剂都能与 TRAIL 联用而呈现协同性从而不仅降低机体对 TRAIL 的耐药性并且可以减少抗肿瘤制剂的使用，如此一来，增加了患者治疗过程的可持续性，同时也使得抗肿瘤制剂的经济投入及机体副作用有所下降，这为TRAIL的合理利用及开发提供了更加广阔的前景。Sheridan等[10]的研究发现，TRAIL联合化疗药物可以通过上调死亡受体DR5的表达从而诱导肝癌细胞HepG2凋亡。陈儒新[11]发现TRAIL联合卡铂促进人卵巢癌细胞A2780凋亡。胡文献等[12]发现杭白菊提取液和重组腺病毒介导的TRAIL基因联合作用于人大肠癌细胞株DLD1细胞使得凋亡率和TRAIL的死亡受体DR4和DR5表达水平均显著上调。冯忻等[2]发现TRAIL与顺铂联用可以协同抑制卵巢癌细胞株SKOV3和OVCAR3细胞的增殖，而这有可能与死亡受体DR4、DR5表达水平上调有所关联，这与Arts等[13]对临床卵巢癌患者的研究结果相互符合。以上相关研究均印证了死亡受体与不同抗肿瘤制剂联用的可行性与科学性，有所收获的同时也发现了一些尚未完全明确的疑问，有关实验有待进一步丰富以期为将来的实际临床应用引导更为明确的方向。

2 山奈酚的概述及作用机制

山奈酚 (kaempferol) 是一种具有高效、安全、低毒、抗癌协同性等特点的黄酮类化合物，其广泛存在于天然植物如水果、蔬菜、中草药等[3]。又称山奈酚-3、山奈素、山奈黄酮醇、百蕊草素，具有抗癌、抗炎、抗过敏、镇痛、增强抗癌药物疗效等多种生物功能[14]。充分的相关研究证明山奈酚能抑制恶性肿瘤的进展,比如肺癌[15]、结肠癌[16]、肝癌[17]、乳腺癌[18]、膀胱癌[19]等；此外可以与其他肿瘤治疗方案联用协同抗癌[20]。山奈酚抗癌的作用机制如下文所述。

2.1 抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡

凋亡失调是肿瘤发生、进展、转移的关键。抗癌药物疗效的重要指标即其诱导肿瘤细胞凋亡的能力。Lee 等[16]发现，山奈酚可以通过激活细胞表面凋亡受体和线粒体凋亡通路，从而促使结肠癌细胞 HT29 的凋亡，并呈现剂量依赖关系。山奈酚还可通过抑制细胞外信号调节激酶 / 丝裂原活化蛋白激酶(ERK/MAPK) 通路、磷脂酰肌醇 3- 激酶 / 蛋白激酶 ( PI3K-AKT) 通路诱导胃癌细胞凋亡[15]，而对正常的胃细胞没有明显的不良影响。由此可见,山奈酚抗癌机制多种多样,相关领域并未完全明确,有待我们进一步深入探索以便推动从基因水平治愈癌症的进程。

2.2 调节细胞周期

阻滞细胞周期对于遏制癌症尤为重要。MCF-7/DOX 阿霉素耐药性乳腺鳞状细胞癌 G2/M 经山奈酚处理后周期阻滞，而 p53 基因和 p21 基因的表达随之增加[21]。Choi等发现，山奈酚可引起人卵巢癌细胞中P53水平激增，从而激活CDKNlA使得CDK复合体失活以阻滞细胞周期[3]。综上所述，山奈酚可通过多种机制阻滞细胞周期。不妨大胆设想,若山奈酚作用于肿瘤细胞则可以遏制癌症;若山奈酚合理应用于正常细胞,或许可以延缓衰老,增长寿命。而后者尤其需要大量的实验予以证明是否具有科学性、可行性。

2.3 抑制肿瘤增殖、转移、侵袭

癌细胞具有容易浸润、扩散、转移等性质，使得仅仅依靠促使肿瘤细胞凋亡并不能根治癌症或者遏制病程进展，由此控制肿瘤细胞的侵袭亦是抗癌的关键节点。山奈酚也可以通过抑制上皮 -间质转化抑制人非小细胞肺癌细胞的转移[22]，以及抑制 AKT-1 介导的 Smad3 在 Thr179 残基的磷酸化来抑制肺癌细胞迁移[23]。目前，有些癌症因其病程进展迅猛使得患者措手不及,然而山奈酚可以阻碍病程进展有助于将肿瘤限于局部病灶,为患者得到及时救治争取了宝贵的时间。

2.4 增强其他癌症治疗手段的疗效

相关实验证明山奈酚可以增强放射治疗、化学药物治疗的效果。山奈酚可通过抑制 PI3K/Akt 和 ERK 通路和激活线粒体凋亡通路增强放疗对肺癌的治疗效果[15]。山奈酚通过抑制原癌基因 c-myc 的转录协同增强了顺铂对 OVCAR-3 卵巢癌细胞生长的抑制作用[20]。未来或许可将山奈酚用于癌症辅助治疗，与其他抗肿瘤方式联用，以便提高疗效减少副作用改善患者预后。

3 总结

随着生活环境的改变，医疗等科学技术的发展，人们越发关注恶性肿瘤如卵巢癌的防治。卵巢恶性肿瘤患者首先考虑手术，对于失去手术时机，不能耐受手术及术后患者等情况，就需要结合患者具体病情采用以化疗为主的辅助性治疗[1]。现阶段临床的辅助治疗手段是以铂类药物为基础的联合化疗。铂类药物不良反应严重且长期使用容易产生耐药性，所以寻求更安全更有效的治疗方案成为大势所趋[4]。细胞凋亡是药物抑制肿瘤细胞增殖的主要作用机制，以 TRAIL 及其受体为靶点的肿瘤治疗为国内外的相关研究开辟了一条新的道路。TRAIL诱导癌细胞凋亡的相关机制有待进一步探索及明确，以便从源头攻克癌症防治这一世界性难题。山奈酚具有天然、高效、低毒、抗癌协同性等特点，使其成为国内外寻求新型抗癌治疗方案以提高疗效的研究热点，山奈酚致敏TRAIL诱导人卵巢癌细胞凋亡将会使得已有相关研究更为丰富，为肿瘤的防治提供新颖可行的思路。