气相色谱-质谱法在食品检测中的应用探讨

2018-01-16常德市食品检验所

食品安全导刊 2018年15期

□ 刘娜常德市食品检验所

现阶段，已有相关法律来限制或禁止将同化激素应用于食用性动物养殖当中，但一些不良企业或商家受利益驱使，仍大量使用此激素，因而给国民健康带来了严重危害。当前，ASs检测方法有高效液相色谱法、气相色谱-质谱法等[1]。本文以动物肌肉组织当中残留甾类同化激素为例，就此检测法的应用效能作一探讨。

1 实验部分

1.1 试剂与仪器

Agilent5973N型质谱-6890N型气相色谱联用仪（自身配置有适配水浴超声波发生装置）、旋转蒸发仪、Milli-Q去离子水发生器、氮气浓缩仪、12通道半自动固相萃取装置。同化激素标准品。HPLC级的甲醇、乙腈、甲苯及叔丁基甲醚。三甲基碘硅烷；二硫苏糖醇。

运用甲醇进行混合标准储备溶液的制备，各个激素的质量浓度均为100 mg/L，存放于-18 ℃下，避光。于无水环境下，进行衍生化溶液的制备，保存于-4～0 ℃下（避光），静置且过夜后，方能使用。

1.2 样品前处理

（1）制样：精取100～200 g动物肌肉组织样本，搅拌器制样，然后置于密封环境中，温度控制在18 ℃。

（2）均质与酶解：取匀质与酶解试样5.0 g，置入50 mL离心管，将醋酸缓冲溶液加入其中，运用匀质器，匀质2×20S（10 000 r/min），然后将酶溶液加入，于37 ℃下，将混合物实施酶解反应，时间为3～4 h。在开展添加试验时，完成均质后，向离心管中加入适量的混合标准溶液，静置，时间为10～15 min，然后将酶溶液加入，开始酶解反应[2]。

（3）提取：针对酶解之后所得到的混合物，将甲醇加入，利用旋涡振荡器，混匀1 min，然后放置到超声波发生器当中，在室温下，运用超声进行提取，时间为5 min。

1.3 测定条件

1.3.1 质谱条件

电子倍增器电压为1 500 V；四级杆温度为150 ℃；电子轰击离子源温度为225 ℃；溶剂延迟为10 min。

1.3.2 色谱条件

载气为高纯氦，压力为86.1 kPa；流量为0.9 mL/min；不分流进样1 μL；接口温度控制在275 ℃；进样口温度控制在275 ℃。升温程序：基础温度为120 ℃，每1 min温度升高数为15 ℃，直至 250 ℃。

2 结果与讨论

2.1 选择衍生化试剂

针对甾体通化激素而言，其含有阿尔法、芳环或者双键，除此之外，还含有贝塔不饱和酮以及含氧基团和卤素（酮基、羟基等），有着比较差的热稳定性，且不易挥发。所以，不适合直接开展GC分析。只有先烷化ASs结构当中的羟基硅与酮基，方能更好地采取GC/MS来开展检查。在实验过程中，选3种衍生化试剂，分别为双氟乙酰胺、三甲基氯硅烷与MSTFA/TMIS/DTE，对9种ASs开展衍生分析，从最终所得到的结果得知，在衍生试剂当中，前2种对9种Ass当中的部分激素衍生的效果不佳，而对于MSTFA/TMIS/DTE而言，则能够烷化Ass结构当中全部的羟基与酮基，且在衍生化反应方面，条件温和，速度快，此外，效率也更高，可以获得分子离子峰；在产物方面，有着比较少的碎片，分子质量高，对于离子监测更为适用。

2.2 方法的检出限、回收率

取各浓度标准液，进样，选与之对应的监测离子，开展定量测定。设定信噪比为3，进行计算，从中将待测的4种雄激素与5种雌激素的相应定性检出限范围求出来，即0.5～1.0 μg/kg；以S/N=10，将方法的定量监测限范围求出来，即1.0～2.0 μg/Kg。9种激素所对应的标准偏差是8.7%～18.3%，回收率为70.7%～86.3%。