柳炳俊

摘 要： 为了解采煤沉陷区不同草鱼（Ctenopharyngodonidellus）混养模式区系组成，通过围网养殖对3个不同混养模式的水体、底泥以及肠道内区系组成进行研究。结果表明，从各模式中分离出的菌株进行16S rDNA序列分析，结果分属于45个属，其中水体中细菌多样性高于底泥和肠道。不同模式之间比较，草鱼单养模式弧菌比例最高，而草鱼、鲢和鲤鱼合理混养模式菌群Shannon-wieners多样性指数最高（p<0.05），弧菌比例最低。这说明草鱼、鲢鱼和鲤鱼的三元合理混养能使系统中微生物的结构和功能得到优化，细菌群落的组成更趋于丰富化和多样化。

关键词： 采煤沉陷；异养菌；弧菌；混养；草鱼；鲢；鲤鱼

草鱼（Ctenopharyngodon idella）是四大家鱼之一，是我国淡水养殖产量最大的一个种，在淡水养殖中占有重要地位[1]。目前，全国大部分地区都能养，2016年我国的草鱼养殖产量是589.88万吨，占淡水鱼养殖总产量的20.45%。然而，对草鱼的研究已涉及到生态养殖、病害防治、微生态制剂等多个方面，但是，草鱼养殖过程中仍然遭受细菌、病毒和寄生虫等引发各种各样的疾病，这些都制约草鱼集约化养殖发展[2]。本研究将系统的研究草鱼养殖体系中水、底泥和草鱼肠道内微生物群落组成及其多样性，了解致病菌比例，探索草鱼混养模式，为草鱼病害的防治提供理论基础和现实意义。

1 材料与方法

1.1放养情况

1.2

1.3 16S rDNA细菌鉴定

PCR模板的制备即煮沸法[3]，16S rDNA扩增正向引物27F：5-AGAGTTTGATCCTGG CTCAG-3，反向引物1492R：5-GGTTACCTTGTTACGACTT-3。 PCR产物送上海生工进行测序，获得的序列用Blast程序与数据库中已存在的细菌16S rDNA核酸序列进行比对，对菌株定属。

2 结果

本研究从养殖水体中共分离得到279株菌，分属于41个属。其中，草鱼单养模式的优势菌属为弧菌属（Vibrio）、芽孢杆菌属（Bacillus）和短波单胞菌属（Brevundimonas），分别占的21.74%、14.51%和10.01%；……