洪 宏，周蔚虹，喻云水,2，贾春华

(1.中南林业科技大学 材料科学与工程学院，湖南 长沙 410004；2.竹业湖南省工程研究中心，湖南 长沙 410004)

粘度法测定竹材薄壁组织和维管束中纤维素的分子量

洪 宏1，周蔚虹1，喻云水1,2，贾春华1

(1.中南林业科技大学 材料科学与工程学院，湖南 长沙 410004；2.竹业湖南省工程研究中心，湖南 长沙 410004)

为测定竹材薄壁组织和维管束中纤维素的分子量，通过从毛竹中分离出薄壁组织和维管束，分别从中提取出纤维素，采用铜乙二胺(CED)粘度法再对两组织中提取出的PTC和VBC分子量进行测定。结果表明：VBC分子聚合度为1 001，粘均分子量达到1.6×105，远高于PTC分子；将得到的结果与XRD测定结果对比，表明测得的VBC结晶度为67.9%，大于PTC的60.3%，纤维素大分子的晶区比例(结晶度)随着纤维素分子量的增加而增大。因此，维管束更适于作为制取竹纤维的原料。

薄壁组织；维管束；PTC；VBC；粘度；分子量

随着石油资源的枯竭和日益突出的环境问题，天然植物纤维的利用已成为材料学学科的一个十分重要的发展方向。竹纤维具有易得、质轻价廉和可生物降解等特点，是一种绿色环保的天然材料[1-5]。竹纤维中纤维素的分子量大小对其力学性能和结晶性能影响较大，竹纤维的聚合度越高，相对分子量越大，竹纤维的某些力学性能也就好[6-7]，因此深入了解竹纤维中纤维素的分子量大小是十分有必要的。

凝胶渗透色谱法(GPC)测定高聚物的分子量及其分布，快速直接，被普遍使用[8-9]，但仍有其局限性，这一方法关键是要选好合适的流动相和良好的高聚物溶剂[10]，尽管CED溶液可以较好地溶解纤维素大分子，但是溶液中的Cu2+会腐蚀色谱柱，这样就对柱子又会有特殊要求。为此，本研究采用粘度法来测定纤维素分子量和聚合度，通过测定纤维素-CED溶液在Ubbelohde粘度计中的流出时间，利用“外推法”计算出纤维素的分子量和聚合度。

1 材料与方法

1.1 原料与仪器

原料：厚壁毛竹，5年生，采自湖南省宁乡县，截取竹秆基部10 cm以上1.5 m长的竹段，通过手工分离出竹材中薄壁组织和维管束纤维，过120目标准筛，干燥备用。

仪器：超声波清洗器、超级恒温水浴、真空干燥箱、Ubbelohde粘度计（毛细管内径0.8 mm）、X-射线衍射仪（北京普析通用仪器有限责任公司XD-2型）。

试剂：氢氧化钾、过氧化氢、乙二胺、硫酸铜五水化合物、氨水、氢氧化钠、1 mol/L HCl标准溶液、10%KI溶液、0.1 mol/L Na2S2O3标准溶液。

1.2 试验原理

粘度是指液体对流动所表现的阻力，这种阻力反抗液体中相邻部分的相对移动，可看作由液体内部分子间的内摩擦而产生。高聚物溶液的粘度与其分子量之间有一定的关系，利用粘度来测定高聚物的分子量，这种方法称为粘度法，它是目前常用的测定高聚物分子量最简单直接的方法之一。

溶液黏度与纯溶剂粘度之比称为相对粘度ηr。

式中：η、η0为聚合物溶液与纯溶剂在同一温度下的粘度。

当液体在毛细管粘度计中因重力作用流出时遵循Poiseuille定律[11]。

式中：t、t0为聚合物溶液与溶剂在毛细管中的流出时间。

高聚物溶液的粘度比纯溶剂粘度增加的分数称为增比粘度ηsp。

为了消除高聚物分子之间的内摩擦，可将溶液无限稀释，使每个高聚物分子彼此相距甚远, 其相互干扰可以忽略。这时溶液所表现出的粘度行为基本上反映了高分子与溶剂分子之间的内摩擦。这一粘度的极限值称为特性粘数，记为[η]

式中：ηsp/c为比浓粘度，表示单位浓度增加对溶液增比粘度的贡献；lnηsp/c为比浓对数粘度，表示单位浓度增加对溶液相对粘度自然对数值的贡献；c为聚合物溶液的浓度。

由粘度计可测出聚合物溶液与溶剂在毛细管中的流出时间测出t和t0，求出了相对粘度ηr之后，根据粘度对浓度的依赖关系的经验公式[12]：

因此，只要配制几个不同浓度的溶液，分别测定溶液及纯溶剂的粘度，然后计算出ηsp/c、lnηr/c在同一张图上作ηsp/c、lnηr/c对c的线性关系函数图，两条直线外推至c→0，其共同的截距即为特性粘数[η]（如图1所示）。

图 1 ηsp/c-c 和 lnηr/c-cFig.1 ηsp/c-c and lnηr/c-c

实验证明，当聚合物、溶剂和温度确定以后，[η]与聚合物的粘均分子量之间可以用Mark-Houwink非线性方程表示[13]，即

式中：K为比例常数；α为与聚合物分子形状有关的经验常数；为聚合物的粘均分子量。这样，只要知道了参数K和α值，即可根据所测的[η]值计算试样的粘均分子量。

纤维素是以葡萄糖为单体的天然直链高分子聚合物，在用粘度法测定纤维素分子量时，需要选择合适的纤维素溶剂，一般纤维素的溶解多使用氢氧化铜与氨或者胺的配位化合物，如铜氨溶液或铜乙二胺溶液（CED溶液），铜氨溶液的优点是具有较高的溶解能力，缺点是对氧与空气具有非常大的敏感性（发生纤维素的氧化降解），而纤维素的CED溶液较铜氨溶液稳定，因此纤维素受到的氧化降解较少，测得的纤维素的聚合度也较为准确。所以只要配制几个不同浓度纤维素-CED溶液，利用乌氏粘度计分别测定溶液及纯溶剂的粘度，通过“外推法”求得特性粘数[η]。在25℃时，对于纤维素-CED的溶液体系，K为2.8×10-4g/(100 mL)，α为0.8[14]，则可由式（7）计算出纤维素粘均分子量。

1.3 铜乙二胺溶液（CED溶液）的制备及标定

CED溶液的制备及标定：参照GB/T1548—2004。

1.4 纤维素样的制备

薄壁组织和维管束粉末经过苯-醇抽提后，取2 g绝干试样，分别置于250 mL锥形瓶中，加入50 mL5%KOH溶液，55℃水浴加热处理3 h，用G3玻璃滤器抽滤，蒸馏水洗涤滤层至中性，再将滤渣转移至250 mL锥形瓶中，加入100 mL冰醋酸和过氧化氢溶液（体积比为1∶1），室温下反应24 h，过滤，残渣用蒸馏水洗涤至中性，最后转入真空干燥箱中干燥24 h，干燥后所得的试样即为两组织中分离出来的纤维素样，纤维素的提取流程图如图2所示。

图2 纤维素的提取流程Fig.2 Extraction process of cellulose

1.5 试样粘度的测定

纤维素-CED溶液的制备：称取一定质量的试样（精确至0.000 1 g）于100 mL锥形瓶中，加入少许铜粉（由于氧气对CED溶液中的纤维素有一定的降解作用，加入适量铜粉可进一步确保纤维素无降解作用），加入25 mL蒸馏水使其润胀，然后精确移入25 mL CDE溶液，塞紧瓶塞置于超声清洗器中25 ℃超声处理10 min，直至试样完全溶解，后将其浸入25 ℃恒温水浴中备用。

粘度的测定：调节超级恒温水浴25 ℃不变，将粘度计安装在恒温水浴中，用移液管移取10 mL的纤维素-CED溶液于粘度计中，用洗耳球将溶液吸至粘度计上标线以上，然后让溶液自然流下，当溶液的到达上标线时开始计时，准确测量溶液刚好到达下标线时的时间，平行测定3次（误差在0.2 s以内），取其平均值，然后依次添加5 mL的纯溶剂（VCED∶V水=1∶1）稀释，测定稀释后浓度下的纤维素-CED溶液在粘度计中的流出时间t；清洗烘干粘度计，测出纯溶剂在粘度计中的流出时间t0，按照公式ηr=计算出对应的相对粘度。

1.6 纤维素的XRD分析

对分离出的竹材VBC和PTC采用X-射线衍射仪进行测试。仪器参数：Cu靶Kα射线，管压40 kV，管流40 mA。扫描范围：2θ=5°～50°。扫描方式：连续扫描，扫描速度4°/min。样品倾斜：0.05°。调整时间：1.50 s。

2 结果与分析

2.1 薄壁组织和维管束的化学成分分析

竹材薄壁组织和维管束的化学成分分析参照国家标准进行，其结果见表1。两者的灰分和木质素含量相差不大，分别在1%和20%左右；薄壁组织的苯醇抽出物含量为10.7%，比维管束中高出2倍以上，半纤维素含量也要高于维管束，这是因为薄壁组织是营养组织，贮存光合作用产生的养分，因此有机物和糖分含量较高；而维管束中纤维素含量占46.74%，明显高于薄壁组织中的28.53%，这是维管束构成了竹材的内部骨架，需要足够的强度承受外部载荷和弯曲变形，因此纤维素含量较高。正是由于两组织在植物体中功能和作用的不同，才有了化学成分上的这些差异。

表1 毛竹薄壁组织和维管束中化学组分的质量分数Table 1 Main chemical compositions of parenchymal tissue and vascular bundle %

2.2 PTC和VBC特性粘数和分子量

纤维素为天然的高分子聚合物，广泛用作造纸、纺织、化工、能源等领域的原材料[15]，材料的基本要求是强度，分子量是纤维素使用时总是需要考虑的重要指标。采用粘度法测纤维素的分子量，即通过测定不同浓度下的纤维素-CED溶液在乌氏粘度计中的流出时间t和纯溶剂的流出时间t0，然后以t和t0计算出相对粘度ηr和增比粘度ηsp，再结合对应的溶液浓度c，计算出比浓粘度ηsp/c和比浓对数粘度lnηr/c，表2和表3分别为薄壁组织纤维素（PTC）和维管束纤维素（VBC）试样粘度实验测定结果。用ηsp/c和lnηr/c对c作图，得到ηsp/c～c和lnηr/c～c散点图，然后分别对ηsp/c～c和lnηr/c～c进行一次线性拟合（如图3图4所示）；将两条直线外推至c=0（即Y轴截距），分别得到特性粘数η1和η2，η1和η2的平均值即为双直线外推法的特性粘数[η]，最后求出平均聚合度DP和粘均分子量。

表2 PTC试样的测定结果Table 2 Experimental results of parenchymal tissue cellulose

表3 VBC试样的测定结果Table 3 Experimental results of vascular bundle cellulose

图3 PTC ηsp/c～ c和 lnηr/c～c的关系Fig.3 The plot of ηsp/c~c and lnηr/c~c of parenchymal tissue cellulose

图4 VBCηsp/c～c和lnηr/c～c的关系Fig.4 The plot of ηsp/c~c and lnηr /c~c of vascular bundle cellulose

2.3 PTC和VBC的XRD分析

根据X-射线的研究，纤维素大分子的聚集，一部分的分子排列比较整齐、有规则，呈现清晰的X-射线图，这部分称之为结晶区；另一部分的分子链排列不整齐，较松弛，但取向大致与纤维主轴方向一致，这部分称之为无定形区或非晶区。纤维素的聚集状态，即所谓纤维素的超分子结构，就是形成一种由结晶区和无定形区交错结合的体系（如图5所示），从结晶区到无定形区是逐步过渡的，无明显界限，一个纤维素大分子的分子链可以经过若干结晶区和无定形区。在纤维素的结晶区旁边存在相当大的空隙，一般大小为100～1 000 nm[20]。结晶区的特点是纤维素分子链取向良好，密度较大，分子间的结合力最强，故结晶区对力学强度的贡献大。非结晶区的特点是纤维素分子链的取向性较差，分子排列无序，密度较小，且分子间的结合力较弱（分子间距较大，氢键结合数量少），故非晶区对力学强度的贡献也就小。

图5 纤维素大分子链结晶区与无定形区Fig.5 Crystalline region and amorphous region of the cellulose molecular chain

图6显示的是竹材VBC和PTC的X-射线衍射图，两组曲线都在 2θ=15.1°，22.1°和 34.8°观察到了衍射峰，这三处特征峰对应纤维素Ⅰ型结构[21-22]，说明本实验中分离提取方法未影响天然纤维素（纤维素Ⅰ型）的结晶形式。纤维素的结晶度是指纤维素构成的结晶区占纤维素整体的百分率，它反映纤维素聚集时形成结晶的程度，图6中最强峰位于22.1°，来源于纤维素晶面002。通过计算可得出本实验分离出的竹材VBC结晶度为67.9%，大于PTC的60.3%。由于纤维素的大分子链是结晶区和无定形区交错构成（晶区占的比例大），而VBC分子的聚合度和分子量高于PTC，VBC分子链较长，因此分子链中晶区所占的比例就要比PTC要大（反映在X-射线衍射图中22.1°处的晶区衍射峰强度明显较大），计算得到的结晶度VBC也就较大。实验中VBC结晶度的增加可归因于VBC分子量的增大，大分子链中晶区所占比例增加。

图6 PTC和VBC的X-射线衍射图Fig.6 X-ray diffraction patterns of PTC and VBC

3 结 论

本文中利用粘度法测定竹材薄壁组织和维管束中纤维素分子的分子量，通过测定不同浓度纤维素-CDE溶液在Ubbelohde粘度计中的流出时间，再由粘度和浓度之间的依赖关系，利用外推法计算出PTC和VBC分子的粘均分子量，发现竹材维管束中纤维素粘均分子量达到160 000，聚合度为1 001，远高于薄壁组织中纤维素分子，维管束更适于作为制取竹纤维的原料。

将粘度法的测定结果与X-射线衍射测定的结果进行对照分析，结果表明，竹材中纤维素的结晶度受纤维素分子量大小的影响，由于VBC聚合度较大，分子链较PTC长，分子链中晶区所占比例增加，结晶度也就随之增大，纤维素分子量大小影响其结晶度的大小。

[1] 杨开良.我国竹产业发展现状与对策[J]. 经济林研究,2012,30(2): 140-143.

[2] Yu Y, Wang H K, Lu F,et al.Bamboo fibers for composite applications: a mechanical and morphological investigation[J].Journal of Materials Science, 2014,49(6):2559-2566.

[3] Tran D T, Nguyen D M, Ha Thuc C N,et al.Effect of coupling agents on the properties of bamboo fiber-reinforced unsaturated polyester resin composites[J]. Composite Interfaces, 2013, 20(5):343-353.

[4] Ren D, Yu Z X, Li W J,et al.The effect of ages on the tensile mechanical properties of elementary fibers extracted from two sympodial bamboo species[J].Industrial Crops & Products, 2014,62: 94-99.

[5] 黎祖尧,李晓霞.厚竹种质性状与生理活性研究综述[J].经济林研究,2013,31(2):167-170.

[6] 王 洁,胡云楚,徐晨浩,等.纳米纤维素尺寸和形态的可控制备与表征[J].中南林业科技大学学报,2015,35(5):133-140.

[7] 陈明凤.纤维素的去结晶[D].广州:华南理工大学,2011.

[8] 张慧慧,沈弋弋,邵惠丽,等.碳纤维用Lyocell原丝的纤维素分子量及其分布[J].上海纺织科技,2003,31(6):10-12.

[9] 朱振华,刘羿君,封云芳,等.竹纤维素在LiCl/DMAc体系中分子量大小和分布的研究[J].浙江理工大学学报,2008,25(3):248-251.

[10] Shen L, Li X J, Li J C,et al.Determination of molecular weight and distribution of tetra fluoroethylene- hexa fluoropropylene copolymers by a dynamic rheology method[J]. Journal of Macromolecular Science, 2012,51(2): 383-392.

[11] 金日光,华幼卿.高分子物理[M].北京:化学工业出版社,2006: 116-119.

[12] 项尚林,余人同,王庭慰，等.粘度法测定高聚物分子量实验的改进[J].实验科学与技术,2009,7(5):37-41.

[13] Kuz’mina N, Moiseev S, Krylov V,et al. Determination of the molecular weight of barley β-glucan using intrinsic viscosity measurements[J].Journal of Analytical Chemistry,2015,70(1):32-38.

[14] 杨淑慧,植物纤维化学[M].北京:中国轻工业出版社,2001.

[15] 张智峰.纤维素改性研究进展[J].化工进展,2010,29(8):1493-1501.

[16] 蒋应梯,许 炯.竹纤维素分子聚合度的粘度测定法及其应用[J]. 林产化工通讯,2005,39(3):24-27.

[17] 李 权,林金国,刘主凰,等.福建主要竹材纤维化学性质的差异分析[J].竹子汇刊研究,2014,33(2):5-10.

[18] 张世源,周湘祁.竹纤维及其产品加工技术[M].北京:中国纺织出版社,2008:36-37.

[19] 杨革生.Lyocell竹纤维素纤维的制备及结构与性能的研究[D].上海:东华大学,2009.

[20] 高香芬.超低温冷冻真空复温处理后天然纤维结构性能及抗菌性研究[D].苏州:苏州大学,2010.

[21] Ken-ichi S,Haruhiko O,Syunichiro M.Structure and Mechanical Behavior of Cellulose Nano fiber and Micro-Fibrils by Molecular Dynamics Simulation[J].Soft Nanoscience Letters, 2013(3): 58-67.

[22] 蒋建新,杨中开,朱莉伟,等.竹纤维结构及其性能研究[J].北京林业大学学报,2008,30(1):128-132.

Determination of molecular weight of parenchymal tissue and vascular bundle cellulose in bamboo by viscosimetry

HONG hong1, ZHOU Weihong1, YU Yunshui1,2, JIA Chunhua1
(1. School of Materials Science and Engineering, Central South University of Forestry &Technology, Changsha 410004, Hunan,China; 2. Hunan Provincial Engineering Research Center of Bamboo Industry, Changsha 410004, Hunan, China)

To measure the molecular size of cellulose between parenchymal tissue and vascular bundle in bamboo, in this research,the molecular weight of parenchymal tissue cellulose (PTC) and vascular bundle cellulose (VBC) extracted from parenchymal tissue and vascular bundle were determined by CED viscosimetry. The results showed that the VBC polymerization degree was 1001, and the viscosity average molecular weight (Mη) reached 1.6×105, much higher than that of PTC molecular’s. Meanwhile, the obtained results were compared with the XRD results, the comparison showed that the crystallinity of VBC was 67.9%, higher than PTC with a crystallinity of 60.3%, suggesting that the ratio of crystalline region in cellulose macromolecule increased with the increase of the molecular weight. As a result, the vascular bundle is more suitable for producing bamboo fiber.

parenchymal tissue; vascular bundle; PTC; VBC; viscosity; molecular weight

S785；S795

A

1673-923X(2017)01-0112-06

10.14067/j.cnki.1673-923x.2017.01.019

2015-10-17

国家级林业科学技术推广项目；汽车内饰件用纤维制造技术应用示范（2012-63）；国家林业公益性行业科研专项“热塑性竹纤维复合基材关键技术研究”（201404512）

洪 宏，硕士研究生 通讯作者：喻云水，博士，教授，博士生导师；E-mail：yuyunshui@sina.com

洪 宏，周蔚虹，喻云水，等. 粘度法测定竹材薄壁组织和维管束中纤维素的分子量[J].中南林业科技大学学报，2017,37(1): 112-117.

[本文编校：谢荣秀]