CD63在戊型肝炎病毒感染中的作用机制
2017-12-27张黎温智恒田亚宾黄维金王佑春
张黎,温智恒,田亚宾,黄维金,王佑春
中国食品药品检定研究院,北京 102629
CD63在戊型肝炎病毒感染中的作用机制
张黎,温智恒,田亚宾,黄维金,王佑春
中国食品药品检定研究院,北京 102629
本研究旨在寻找戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)衣壳蛋白ORF2的相互作用蛋白,探讨其在HEV感染中的作用。采用酵母双杂交方法从人肝细胞文库中筛选与HEV ORF2相互作用的蛋白,结果显示CD63与HEV ORF2相互作用。Pull-down实验提示原核表达的ORF2与CD63结合较弱,而免疫共沉淀实验提示真核表达的ORF2能与CD63结合。流式细胞术检测结果显示,HEV易感细胞PLC/PRF/5细胞膜表面的CD63表达水平普遍低于HEV非易感细胞。过表达CD63抑制PLC/PRF/5细胞的HEV感染,而小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)干扰CD63表达则促进HEV感染。结果提示,CD63能与HEV ORF2相互作用,可能抑制HEV感染肝细胞。
戊型肝炎病毒;ORF2;CD63
近年来,戊型肝炎在我国许多地区已超过甲型肝炎,成为发病率最高的急性病毒性肝炎。戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)主要经粪-口途径传播,也可经输血传播和母婴垂直传播。虽然大多数戊型肝炎为急性感染,并具有自愈性,但一些免疫力低下的特殊人群,如器官移植、艾滋病等患者[1]感染HEV后会发展为慢性肝炎、急性重症肝炎(暴发性肝炎),甚至死亡。妊娠晚期妇女感染HEV的病死率也高达20%[2-4]。
HEV为单链正向RNA病毒。虽然HEV一直被认为是无包膜病毒,但近来一些研究认为其产生过程中可能存在带有包膜的形式。经胆汁处理后的HEV在粪便内呈无包膜状态。HEV基因组全长7.2 kb,编码3个开放读码框(open reading frame,ORF)。ORF1编码病毒转录和复制相关病毒,ORF2编码长度为660个氨基酸(amino acid,aa)的病毒衣壳蛋白,ORF3编码与病毒释放有关的小分子磷蛋白。……
