赵红玲，吕逢春

（承德医学院，河北承德　067000）

技术方法

高产谷胱甘肽菌种的选育及发酵条件的优化

赵红玲，吕逢春

（承德医学院，河北承德067000）

谷胱甘肽；酿酒酵母；诱变；发酵

谷胱甘肽(GSH)化学名称为γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酰-甘氨酸，是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸经肽键缩合而成的活性三肽。GSH的分子质量为307.33Da，熔点为189-193℃(分解)，晶体呈无色透明细长柱状，等电点为5.93。GSH广泛分布于动、植物和微生物中，在生物体内对维持机体适宜的氧化还原环境起着至关重要的作用[1]。在临床上，GSH是一种治疗肝病、肿瘤、白内障及衰老等的重要生化药物，在食品添加剂和运动营养学上也倍受关注，需求量在不断增加[2]。

GSH的生产方法主要有萃取法、化学合成法、发酵法和酶法，其中发酵法生产GSH的工艺最为普遍、重要，但目前我国GSH的发酵水平不高。因此，菌种选育得到GSH高产菌株，提高GSH发酵产量，成为工业化可行的前题[3]。本研究采用紫外线和亚硝基胍对出发菌株进行诱变，同时使用乙硫氨酸、1，2，4-三氮唑作为筛选模型，最终筛选得到遗传性能稳定的GSH高产菌株zl136，并通过优化发酵条件、确定发酵工艺为扩大培养提供参考数据。

1　材料

1.1菌株斜面菌种：本实验室保藏酿酒酵母(Saccharom-yces cerevisiae)zl。

1.2试剂GSH标准品、四氧嘧啶（ALLOXAN）、乙硫氨酸，美国Sigma公司；其它试剂均为国产分析纯。

1.3培养基普通平板培养基（g/L）：蛋白胨20，葡萄糖20， KH2PO41，MgSO40.5，琼脂20；斜面培养基（g/L）：酵母粉10，蛋白胨20，葡萄糖20，琼脂20，pH值为6.0；种子培养基（g/L）：酵母粉10，蛋白胨20，葡萄糖20；发酵培养基（g/L）：酵母粉10，蛋白胨20，葡萄糖20，L-Cys 0.73，硫酸镁0.6；……