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6-羟基多巴模型大鼠salsolinol氮甲基转移酶活性检测

2017-12-21张镇松邓玉林

中国比较医学杂志 2017年12期
关键词:检测手术模型

张镇松,柯 酩,邓玉林*

(1.中国科学院生态环境研究中心,北京 100085; 2.北京理工大学生命学院,北京 100081)

6-羟基多巴模型大鼠salsolinol氮甲基转移酶活性检测

张镇松1,柯 酩2,邓玉林2*

(1.中国科学院生态环境研究中心,北京 100085; 2.北京理工大学生命学院,北京 100081)

研究报告

目的应用6-羟基多巴(6-hydroxydopamine, 6-OHDA)制作帕金森病(Parkinson’ s disease,PD)大鼠模型,并对大鼠外周血淋巴细胞中salsolinol氮甲基转移酶(SNMT)的活性进行测定。方法利用单侧双点注射6-OHDA损毁大鼠纹状体,构建PD模型并对模型进行行为学评价;从模型大鼠外周血淋巴细胞中提取SNMT粗酶液,建立酶反应产物N-methyl-salsolinol(NMSal)的高效液相色谱串联三重四极杆质谱检测方法,以NMSal的生成量表征SNMT的活性。结果18只经过6-OHDA注射的大鼠共有7只经阿朴吗啡诱导后表现为恒定向未损毁侧旋转(>7 r/min),建模成功率为38.9%。建立了基于多反应监测技术的SNMT活性的高选择性、高灵敏度、高重复性的表征方法。该方法中NMSal的检出限和定量限分别达到49 pmol/L和98 pmol/L,日内和日间精密度均在6.0%以下。检测结果显示PD组大鼠外周血淋巴细胞中SNMT的活性与假手术组、正常组相比差异有显著性(P< 0.01,n=5),而正常组和假手术组之间差异无显著性(P> 0.05,n=5)。结论外周血淋巴细胞中SNMT活性可能反映出PD发病状况,有望成为诊断的指标之一。

Salsolinol氮甲基转移酶;帕金森病;6-羟基多巴;外周血淋巴细胞;高效液相色谱串联三重四极杆质谱

帕金森病(Parkinson’ s disease, PD)是一种与遗传和环境因素相关的中老年神经系统变性疾病,主要临床特征为静止性震颤、肌强直、运动和认知功能障碍等[1]。该病平均发病年龄55岁,并随年龄增加发病率呈上升趋势。P……

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