严凯　罗泽丽　胡芳丽　伍廷辉　严金成　黄荣茂

摘要：为查清刺梨白粉病病原菌的越冬场所、初侵染源以及发生规律，为防治工作提供参考依据。采用随机5点取样调查方法并采集分析样本，通过镜检观察白粉病病菌的越冬场所、初侵染源；同时，利用室内孢子萌发法观察其生物学特性，分析刺梨白粉病在田间的发生和发展关系。结果表明，刺梨白粉菌（Sphaerotheca sp）以菌丝体和分生孢子分别在休眠芽和大田新鲜幼叶上越冬，成为次年初侵染源，未发现有性世代；发病适宜条件为：温度15～25 ℃，相对湿度80%以上，pH值5～6；于4月上中旬开始发病，潜育期4～5 d，分生孢子的散布主要在白天，5、6月是发病高峰期，嫩叶发病较严重，苗龄小的发病轻，坡地较平地发病轻，7月以后病情下降。建议加强肥水管理、修剪整枝、增施钾肥，在4月初始发期的晴天10：00左右喷药防治最好，能有效控制病害发生危害。

关键词：刺梨；白粉病；发生规律；生物学特性；初侵染源

中图分类号： S4366121+9文献标志码： A

文章编号：1002-1302（2017）21-0119-04

HJ13mm]

收稿日期：2017-04-18

JP3]基金项目：贵州省科技合作计划（编号：黔科合LH字2015]7621号）。

作者简介：严凯（1981—），男，贵州六盘水人，硕士，农艺师，主要从事植物保护学研究。E-mail：pxyankai@126com。

通信作者：黄荣茂，教授，主要从事植物保护学研究。E-mail：lk81@163com。

刺梨（Rosa roxburghii Tratt）属蔷薇科蔷薇属植物，原产于中国，是贵州省特有的优势资源，主要分布在贵州省，几乎遍布全省各市（县）；其次是四川、云南等省，在广西壮族自治区西北部、湖北省西部、陕西省南部及湖南省西部等地也有分布。刺梨果实具有浓郁的特殊香味，肉脆、酸甜，被誉为水果中的“维生素C之王”，除鲜食外，更是加工成高级饮品的优质原料，除此之外，刺梨还具有防癌、抑癌、增强免疫力、抗衰老、降血脂、解铅中毒等医疗保健作用，与猕猴桃、山楂并誉为我国三大新兴水果1-3]。

全国刺梨产业资源总量近年实现较快增长，仅贵州省，截至2015年1月，总规模突破333万hm2。刺梨产业已逐步成为贵州省推动部分地区农业产业结构调整，促进农民增收的新增长点。在《贵州省刺梨产业发展规划（2014—2020年）》中明确指出，计划到2020年，在黔南州、安顺市、六盘水市、毕节市新建刺梨基地6万hm2，在全省现有基础上总面积达到8万hm2。在种植规模扩大的同时，刺梨病虫害的发生危害也越来越严重，尤其是白粉病菌Sphaerotheca pannosa（Wallr） Lev]的发生危害最大，严重影响刺梨的产量和品质，阻碍贵州省刺梨产业的健康发展4]。为促进刺梨生产的健康发展，于2014—2016年对贵州省刺梨栽植区开展调查，对该病的危害和发生规律、生物学特性进行系统的研究，为防治工作提供参考依据。

1材料与方法

11材料

111供试菌种白粉病菌5]的分生孢子采自田间自发病株，以备接种孢子萌发试验。

112刺梨试株取自贵州省六盘水市盘县刺梨基地栽培区内，以备病情调查和接种用。

113仪器孢子捕捉器BZY-HY-B，南京恒裕仪器公司生产。

12方法

121调查方法和时间采用随机5点取样，每点调查 100～200个样，以五级分级计数法统计6]。从1—12月，根据试验需求进行。病情分级标准：0级，整个复叶无病班；1级，有1～2个小叶发病，菌丝稀薄；2级，有3～4个小叶发病，菌丝较厚；3级，有5～6个小叶发病，菌丝浓厚；4级，有7个以上小叶发病，菌丝浓厚。

122越冬场所及初侵染来源观察进入冬季，刺梨叶普遍落光，为了查明刺梨白粉病的越冬场所和初侵染来源，对近地面幼苗叶芽萌发的新叶和植株休眠芽进行调查研究，验证刺梨白粉病菌在田间是否能在幼苗新叶和休眠芽上过冬，笔者所在实验室在贵州省盘县刺梨基地分别于2014、2015年冬季定点、定期调查越冬场所及初侵染来源。同时在冬季12月上旬采集田间新鲜病叶，将病叶放在铺有吸水滤纸的灭菌培养皿（直径120 mm）内置于-5～-1 ℃恒温冰箱内保濕培养 20 d，然后取分生孢子用染色法检查孢子的成活率，用作孢子萌发试验。观察刺梨休眠芽解剖镜检结果与移栽到温室内的植株芽的开放及病害发生情况之间的联系，并定期观察刺梨基地田间病害发生状况5-6]。

123生物学特性试验6-8]定时观察白粉病菌孢子萌发情况，按照试验设计时间，每处理4张叶片，3次重复；在低倍镜下记录3个视眼的孢子萌发情况，每个视眼随机检查100个孢子，以孢子的芽管超过孢子直径一半时作为孢子萌发的评判标准。按陈年春的方法9]计算萌发率和抑制萌发率。

1231温度对分生孢子萌发的影响试验将健康刺梨鲜嫩新叶片研碎，用蒸馏水稀释50倍过滤滴在凹玻片内，再将新鲜病叶上的分生孢子蘸于汁液中，分别置于-3、0、1、3、5、7、9、11、…、31、33、35 ℃下保湿培养48 h，分别进行分生孢子萌发率测定。

1232湿度对分生孢子萌发的影响试验在室温 20～28 ℃ 情况下，将采集的刺梨新鲜病叶上的白粉菌分生孢子直接抖入已处理干净的凹玻片上，并放到相对湿度分别为0、50%、70%、90%、100%的干燥器内，散光下培养48 h，对分生孢子萌发率进行测定。

1233pH值对分生孢子萌发的影响试验在室温 20～28 ℃ 下，将新鲜病叶上的分生孢子蘸于配制好的不同pH值的缓冲溶液中，将含有分生孢子的不同pH值的缓冲溶液分别滴到凹玻片内，并放入已准备好的饱和湿度的干燥器内，散光下培养24 h，分别对分生孢子的萌发率进行测定。endprint

2结果与分析

21病害的发生规律

211越冬状态及初侵染来源

2111刺梨白粉病田间调查

为了解该病以何种状态越冬及其初侵染来源，笔者所在实验室于2014、2015年的冬季在盘县刺梨园作了定期观察，在2年最低旬均温分别为 -17、-03 ℃的条件下，田间仍能找到新鲜病叶。在冬季，田间刺梨普遍落叶，但刺梨园近地面幼芽仍能不断萌发产生新叶，经2014、2015、2016年分别在上年的12月起至次年3月对刺梨田间状况进行观察，结果见表1。

2014—2016年的每年12月至次年2月，分别在上一年发病较严重区域采集了1 000张落叶和1 000个枝条，经镜检均未发现白粉病菌闭囊壳，也未发现其有性阶段。经镜检发现，在该区域采集并解剖的1 000个休眠芽中平均有305个芽鳞下表面和芽组织表面具有白粉病菌的菌丝，占305%。在该区域按5点采样法随机采取100张新叶，经镜检，在每年的12月都能发现新叶片具有白粉病菌的菌丝和分生孢子，均占新叶数量的400%，且从1月开始随着月份的增加带菌叶片数增加。

2112室内验证试验

2015年11月，将20株在刺梨园自然感病的刺梨移栽于室温15～25 ℃的温室内，2016年1月进行休眠芽开放调查记录，开放的521个休眠芽中有17个病芽，占总数的326%，与在大田调查开放芽发病率相当。同时将开放病芽上产生的分生孢子放入密闭容器内做孢子萌发试验，在20 ℃、相对湿度100%的条件下培养48 h，其萌发率为 1560%，结果与室外大田采集的分生孢子萌发率1520%相近。同时，用已发病叶片产生的分生孢子接种在健康嫩叶上，5 d即出现病症。

JP+1]在大田发病盛期和秋季分别采集50张病叶置于室外自然条件下，次年3月取回镜检观察发现原病菌分生孢子严重干缩，将其放入密闭容器内在20 ℃、相对湿度100%的条件下保湿培养，经观察分生孢子不萌发。将叶面上的病原菌菌丝和孢子悬浮液接种刺梨健康嫩叶，仍未发病。由此判断，刺梨落叶叶面上的菌丝和孢子经过短暂越冬失去了侵染能力。

2015年12月中旬将田间采集新鲜病叶上的白粉菌放置在-5～-1 ℃条件下保绿培养20 d，使其为不断生成的分生孢子和菌丝体提供生理养分。经染色镜检得知，分生孢子的成活率为29%～35%。分生孢子保湿保温（20～22 ℃）培养48 h，萌发率为39 %。试验证明，冬季刺梨白粉病菌可以在刺梨田间近地面幼芽萌发产生的新叶上越冬。

212孢子的传播

由表2可知，通过对病菌孢子进行捕捉试验发现，刺梨白粉病的分生孢子散布量主要是白天，占昼夜散布总量的923%，夜晚较少，白天孢子散布量以10：00以后较多。由此推断，刺梨白粉病菌的分生孢子靠风力传播。

213潜育期的测定

通过室内试验进行刺梨白粉病菌的潜育期观察，在平均室温为212 ℃和相对湿度为80%的温室环境条件下以孢子悬液涂抹接种刺梨健康嫩叶片，结果由表3可知，该病的潜育期约4～5 d。

214病情消长规律

按照庞纯翠等的调查方法6]，于3月中旬，在田间刺梨的展叶率达80%以上时开始进行白粉病病情普查。分别于2015年4月1、5日在大田发现病叶，随即在刺梨园采用5点调查取样，每点固定1株，每株分3個部分在上、中、下各定1个枝条，每周定期调查记录1次花蕾、幼果和叶片的发病率和病情指数，至果实成熟期止。调查结果见表4。由表4可知，4月上中旬刺梨开始现蕾，白粉病开始发生，5月上旬开始进入盛花期，中旬是花蕾、幼果发病高峰期，

5月下旬夏梢开始抽生，新生嫩叶数量猛增，6月叶面白粉病盛发，7月以后，随着叶龄的增加，病情下降。由此可知，白粉病菌主要危害刺梨幼嫩器官的花蕾和嫩叶，病情的发生发展与刺梨的生育期关系密切。

22生物学特性与病害发生、流行的环境条件关系

221温度对分生孢子萌发的影响

由表5可知，刺梨白粉病菌分生孢子在-3 ℃时不萌发，在0～5 ℃之间可以萌发，但萌发率较低，随着温度的升高萌发率增高，但在25 ℃以后，孢子萌发率又随温度的增高而降低，33 ℃以后基本不萌发。结果表明，刺梨白粉病菌分生孢子萌发的适宜温度在 19～25 ℃ 之间。

222湿度对分生孢子萌发的影响

由表6可知，在相对湿度为50%时，刺梨白粉病菌孢子萌发率为46%，萌发率随着相对湿度的增高而升高，在相对湿度100%的条件下萌发率达到456%。试验发现，在相对湿度为0的情况下病菌孢子干瘪变形，丧失萌发能力，在水面上的分生孢子萌发率为 226%，仅为相对湿度100%情况下孢子萌发率的50%不到。试验表明，刺梨白粉病菌孢子萌发以饱和湿度最适宜。

223pH值对分生孢子萌发的影响

由表7可知，当pH值在2～11之间，pH值为2时孢子萌发率为116%，pH值为5时孢子萌发率最高为231%，pH值为11时孢子萌发率最低，萌发率为33%，病菌孢子萌发率随着pH值呈先升高后降低的趋势。由此表明，刺梨白粉病菌孢子适宜在酸性环境中生存，最适pH值为5。

224大田病害发生与气温和相对湿度的关系

据2015年气象资料，在平均温湿度分别为2026 ℃、83%和219 ℃、85%环境下的5、6月及平均温湿度分别为211 ℃、86%和193 ℃、88%环境条件下的7、8月，都属于刺梨白粉病发病的2个高峰期，这与室内孢子萌发试验在温度（15～25 ℃）和相对湿度范围（70%～100%）的条件下萌发率较高关系相符，而 7—8 月的平均气温和相对湿度尽管比较适宜白粉病的暴发，但此阶段刺梨属于成果期和叶片老化期，随着叶龄的增加，病情下降，相反发病较轻。这与2016年的气象资料和发病情况调查基本一致。endprint

225叶的老幼、苗龄与发病的关系

由表8、表9可见，刺梨植株老叶发病较轻，嫩叶发病严重且普遍，与室内孢子萌发试验中嫩叶滤液中孢子萌发率比在老叶滤液中萌发率高一致。病害的发生程度随着苗龄的增长发生危害严重，4年生的植株发病重于1年生的。可能是因为随着植株的生长，树冠增大，病原菌量逐年积累，越冬休眠芽增多和易被侵害嫩叶的表面积增大，发病率和严重程度有所增加，调查结果与程建武等的结论5]一致。

226病害与栽培管理的关系

由表10可知，在秋冬季施1次基肥和春季追肥1次，土地肥力好的地段，刺梨植株生长势较好，发病较轻。土地肥力差的地段，刺梨植株生长不好，枝叶弱小，抗病能力差，发病较重。

227地势与发病的关系

经调查，刺梨种植在山坡的，植株较矮，枝条较少，发病轻，可能是因为通透性好。而栽植平地、洼地的刺梨，枝叶幼嫩，植株生长茂密，通透性较差，发病较重（表11）。

3结论与讨论

根据大田调查及室内试验结果表明，六盘水地区刺梨白粉病菌除了菌丝状态在田间刺梨休眠芽芽鳞下越冬外，病原菌分生孢子和菌丝体也能在近地面新芽产生的新叶上越冬，成为次年的初侵染源。系统调查过程中，未发现其有性世代。在枝条和落叶上未发现病原菌，说明白粉病菌的发生发展与温度和湿度有密切关系。

根据田间调查及室内分生孢子萌发试验分析，在孢子萌发试验中，孢子在嫩叶汁液中的萌发率较老叶汁液高；结合调查地的气象资料，4月以前和7月以后不利于病害的发生发展，5、6月的平均温湿度分别为2026 ℃、83%和219 ℃、85%，又正是刺梨花蕾、幼果和嫩叶的增长期，满足了白粉菌的生理需求，为病菌萌发侵染提供了有利条件，是病害发生暴发流行期。以上试验及调查结果论证了田间病情的消长与气候因素有密切关系外还与白粉菌的生理需求相关。

加强肥水管理，有利于提高刺梨植株抗病免疫能力，还应增强刺梨园通透性，减少病菌发生危害。

4防治建议

根据调查和结果分析，刺梨白粉病的防治时间非常关键，在4月初越冬休眠芽开放时及时采用防治效果较好的哈茨木霉菌、25%粉锈宁、70%代森锰锌等药剂进行防治，建议在晴天早上施药效果较理想5，10-11]。同时，实时施肥、增施钾肥，冬季修剪整枝，保持田间通透性，提高刺梨抗病能力；去除田间秋冬季新生嫩叶、枝条及杂草，可有效降低病原菌初侵染源，减少病菌发生危害。

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