吴洁，侯佳展，程倩，李佳垚，李丹丹，尹逸丛，苏薇

(中国医学科学院北京协和医院检验科，北京 100730)

·临床检验技术研究·

等位基因特异性PCR检测CYP3A5和MDR-1基因多态性方法的建立及临床应用*

吴洁，侯佳展，程倩，李佳垚，李丹丹，尹逸丛，苏薇

(中国医学科学院北京协和医院检验科，北京 100730)

目的用等位基因特异性PCR(ARMS-PCR)检测细胞色素P450酶CYP3A5(A6986G) 和多药耐药基因MDR-1(C3435T)基因多态性，探讨其与肾移植受者他克莫司(Tac)血药浓度和剂量比的相关性。方法根据CYP3A5(A6986G) 和MDR-1(C3435T)基因多态性位点分别设计ARMS-PCR引物，分析72例肾移植受者外周血基因组DNA中该2个基因位点的多态性，同时以DNA测序法为金标准进行验证。化学发光微粒子免疫分析法测定肾移植受者血Tac浓度，并比较术后1个月时不同基因型受者之间血Tac浓度、Tac剂量/Tac用量的差异。结果建立的ARMS-PCR法与DNA测序法检测符合率为100%。72例肾移植受者中，CYP3A5 *1/*1、*1/*3和*3/*3基因型的发生频率分别为18.1%、31.9%和50.0%，MDR-1 C/C、C/T和T/T基因型的发生频率分别为27.8%、58.3%和13.9%。此外，不同CYP3A5基因型肾移植受者的血Tac浓度(P=0.014)和Tac浓度/Tac用量(P=0.019)均存在明显差异，进一步两两比较发现，CYP3A5 *3/*3基因型受者血Tac浓度/Tac用量明显高于*1/*1和*1/*3基因型(P均<0.05)。结论成功建立检测CYP3A5和MDR-1基因多态性的ARMS-PCR法，肾移植受者CYP3A5*3基因多态性与Tac的药代动力学明显相关。

等位基因特异性PCR；细胞色素P450酶CYP3A5；多药耐药基因MDR-1；基因多态性

他克莫司(Tac)是钙调神经磷酸酶抑制剂(CNI)家族的成员，以Tac为基础的免疫抑制药物已广泛应用于临床器官移植后抗排斥反应。然而，Tac的药物治疗窗窄,且生物利用度个体差异大[1]，临床往往需要根据血药浓度来调整用药剂量。此外，药物相关的副作用，如肾毒性，神经毒性和高血糖，会明显降低移植后受体的生存质量[2]。……